OECD TG 405: Wissenschaftlicher und ethischer Ansatz zur Beurteilung akuter Augenreizungen und -verätzungen
Das Auge ist eines der empfindlichsten und anfälligsten Organe des Körpers, wenn es Chemikalien ausgesetzt ist. Augengewebe wie Hornhaut, Iris und Bindehaut können bei chemischem Kontakt irreversible Schäden erleiden, was zu schwerwiegenden Folgen führt, die sogar zu dauerhaftem Sehverlust führen können. Daher ist die Bestimmung der akuten reizenden und korrosiven Wirkungen, die Chemikalien, Pestizide, Reinigungsmittel und industrielle Formulierungen auf das Auge haben können, eine unverzichtbare Voraussetzung für die Sicherheit der Benutzer und die Klassifizierung von GHS (Globally Harmonized System). Unser Labor führt akute Augenreizungen und Korrosionstests gemäß der OECD TG 405 Leitlinien unter Verwendung der aktuellsten wissenschaftlichen Ansätze und in voller Übereinstimmung mit den 3R-Prinzipien.
OECD TG 405: Testprinzip und -umfang
OECD TG 405 ist ein international anerkannter Standard in vivo Prüfprotokoll zur Bewertung des Potenzials für akute Reizungen und Korrosion, das chemische Stoffe und Gemische für das Augengewebe verursachen können. Das Grundprinzip des Tests besteht darin, eine bestimmte Menge der Testsubstanz (normalerweise 0,1 ml Flüssigkeit oder 100 mg Feststoff) in einer einzigen Applikation auf den Bindehautsack des Testauges aufzubringen und die Augenreaktionen zu bestimmten Zeitpunkten (1, 24, 48 und 72 Stunden) einzustufen. Die Bewertung basiert auf vier Hauptparametern: Hornhauttrübung, Irisschädigung, Bindehautrötung (Erythema) und Bindehautödem (Chemie). Jeder Parameter wird auf einer Skala von 0 (abwesend) bis 4 (schwer) bewertet, und der zeitabhängige Verlauf dieser Werte ist entscheidend, um festzustellen, ob die Wirkungen der Substanz auf das Auge reversibel sind.
Das wichtigste Merkmal der OECD TG 405 ist die schrittweise Prüfstrategie die vor Beginn des Tests erforderlich ist. Diese Strategie wurde entwickelt, um unnötigen Tiereinsatz zu verhindern und den Tierschutz in höchstem Maße zu schützen. Der schrittweise Ansatz folgt dieser Reihenfolge:
- Auswertung der verfügbaren Daten: Human- und Tierdaten, Struktur-Wirkungs-Beziehungsanalysen (QSAR), physikalisch-chemische Eigenschaften (insbesondere pH-Wert).
- pH-Screening Stoffe mit einem pH-Wert ≤ 2 oder ≥ 11,5 werden aufgrund ihrer starken Säure-Basen-Eigenschaften direkt als „äugerätzend (Kategorie 1) eingestuft, und in vivo Tests werden nicht durchgeführt.
- validiert in vitro / ex vivo Prüfungen: OECD TG 437 (BCOP — Bovine Corneal Opacity and Permeability Test), TG 438 (Isolated Chicken Eye Test), TG 491 (Short-Term Exposure) In vitro Test) oder TG 492 (Reconstituted Human Cornea-Like Epithelial Test) werden verwendet, um das Potenzial für Korrosion und schwere Schäden im Voraus zu screenen.
- In vivo Prüfung: Wenn die oben genannten Schritte jedoch nicht ausreichen, um das Potenzial einer Substanz für Augenreizungen endgültig zu klassifizieren, in vivo Der OECD-Test TG 405 wird als letzter Ausweg durchgeführt.
Bewertungsparameter und Bewertungssystem
In der nachstehenden Tabelle sind die vier wichtigsten Augenparameter, die nach OECD TG 405 bewertet wurden, die Bewertungskriterien und die klinische Signifikanz jeder Bewertung aufgeführt:
| Parameter | Punktzahl | Definition | Klinisches Äquivalent |
|---|---|---|---|
| Hornhauttrübung | 0 | Keine Trübung | Gesunde, transparente Hornhaut |
| 1 | Streu- oder diffuse Trübung; Irisdetails sind deutlich sichtbar | Leichte Bewölkung; Vision ist minimal betroffen | |
| 2 | Leicht erkennbarer halbtransparenter Bereich; Irisdetails sind leicht verschwommen | Mäßige Hornhautschädigung | |
| 3 | Undurchsichtige Bereiche; Irisdetails sind nicht sichtbar; Pupillenrand kaum erkennbar | Schwere Hornhautschäden; Erholung ist unwahrscheinlich | |
| 4 | Völlig undurchsichtige Hornhaut; weder die Iris noch die Pupille sind sichtbar | Hornhauterosion, hohe Wahrscheinlichkeit dauerhafter Schäden | |
| Iris Schäden | 0 | Normal | Gesunde Iris, normaler Pupillenreflex |
| 1 | Deutliche tiefe Hyperämie, Staus, Schwellungen, verlangsamter Pupillenreflex | Leichte bis mittelschwere Iritis, in der Regel reversibel | |
| 2 | Fehlen von Lichtreflexen, Blutungen, ausgeprägte strukturelle Schäden | Schwere Iritis, Risiko einer dauerhaften Schädigung des Irisgewebes | |
| Bindehautrötung (Erythema) | 0 | Normal | Gesunde, blassrosa Bindehaut |
| 1 | Leichte Staus, ausgeprägte Hyperämie in einigen Schiffen | Leichte Konjunktivitis | |
| 2 | Weit verbreitete dunkelrote Farbe; einzelne Blutgefäße sind schwer zu unterscheiden | Mäßige konjunktivale Entzündung | |
| 3 | Ausgesprochene, weit verbreitete und intensive dunkelrote Farbe | Schwere Konjunktivitis, ausgeprägte Entzündungsreaktion | |
| Bindehautödem (Chemose) | 0 | Kein Ödem | Normale Bindehaut |
| 1 | Leichte Schwellung leicht über normal | Leichte Chemose | |
| 2 | Prominente Schwellung begleitet von teilweiser Eversion der Augenlider | Mäßiges Ödem, leichte Beeinträchtigung der Augenlidfunktion | |
| 3 | Starke Schwellung, wodurch die Augenlider halb geschlossen werden | Schwere Chemose, kann dazu führen, dass sich die Augenlider schließen | |
| 4 | Extreme Schwellung, wodurch sich die Augenlider vollständig schließen | Sehr schweres Ödem; das Auge ist vollständig geschlossen; erfordert einen Notfalleingriff |
GHS Klassifizierung und Interpretation
Die Ergebnisse der OECD TG 405 werden nach den Kriterien des Globally Harmonized System (GHS) in drei Hauptkategorien eingeteilt. Die folgende Tabelle fasst diese Einstufungskriterien und ihre regulatorischen Auswirkungen zusammen:
| GHS-Klasse | Klassifizierung | Kriterien | Kennzeichnung | Sicherheitshinweise |
|---|---|---|---|---|
| Kategorie 1 | Schwere Augenschädigung / Augenätzend | Irreversible Augengewebeschädigung oder dauerhafte Beeinträchtigung der Hornhaut, Iris oder Bindehaut bei mindestens einer Testperson innerhalb von 21 Tagen | Piktogramm: ätzend (GHS05), Signalwort: Gefahr, H318 | P280 (Schutzbrille/Gesichtsschutz), P305+P351+P338, P310 |
| Kategorie 2A | Augenreizend | Positive Augenreaktionen bei mindestens zwei Probanden, vollständig reversibel innerhalb von 21 Tagen | Piktogramm: Ausrufezeichen (GHS07), Warnung: Vorsicht, H319 | P264, P280, P305+P351+P338, P337+P313 |
| Kategorie 2B | Leicht augenreizend | Leichte und vorübergehende Wirkungen, die die Kriterien der Kategorie 2A nicht vollständig erfüllen, aber innerhalb von 7 Tagen vollständig verschwinden | Piktogramm: Keine, Warnung: Vorsicht, H320 (in einigen Vorschriften) | Abhängig von regionalen Vorschriften; einige Behörden verwenden diese Kategorie nicht |
| Nicht klassifiziert | Nicht irritierend | Es werden keine nachteiligen Augenreaktionen beobachtet oder die Auswirkungen sind zu mild, um in die oben genannten Kategorien zu fallen. | Piktogramm: Keine, Warnung: Keine | GHS-Kennzeichnung nicht erforderlich |
In unserem Labor folgen wir der OECD TG 405 Implementation Strategy und den 3R-Prinzipien
Bei der Planung von OECD TG 405-Studien in unserem GLP-zertifizierten Labor wenden wir die 3R-Prinzipien (Replacement, Reduction, Refinement) in höchstem Maße an. Unsere Teststrategie folgt dem unten beschriebenen schrittweisen Ansatz:
| Phase | Methode | Zielsetzung | 3R Beitrag |
|---|---|---|---|
| 1. Datenscreening | Vorhandene Human-/Tierdaten, QSAR, Read-across, in silico Vorhersage | Wenn eine Einstufung aufgrund vorhandener Informationen möglich ist, ist keine Prüfung erforderlich | Ersatz – vollständige Vermeidung von Tierversuchen |
| 2. pH-Wert und physikalisch-chemische Bewertung | pH-Messung, Pufferkapazität, Säure-/Basenreserve | Direkte Einstufung in Kategorie 1 bei extremem pH-Wert (≤2 oder ≥11,5) | Ersatz – keine Tierversuche auf korrosive Stoffe |
| 3. In vitro / Ex Vivo Screening | OECD TG 437 (BCOP), TG 438 (ICE), TG 491 (STE), TG 492 (RhCE) | Bestimmung des Korrosions- und Schwerschadenspotenzials ohne Einsatz von Tieren | Ersatz – in vivo Prüfanforderungen werden deutlich reduziert |
| 4. In Vivo Validierung (Last Resort) | OECD TG 405 – Beginnen Sie mit einem einzelnen Thema, fügen Sie zusätzliche Themen basierend auf den Ergebnissen hinzu | Nur wenn eine endgültige Klassifizierung mit vorherigen Schritten nicht erreicht werden kann | Reduktion – minimaler Tiereinsatz durch schrittweises Testdesign; Verfeinerung – Analgesie und enge Überwachung |
| 5. Einstufung und Berichterstattung | Endgültige Klassifizierung nach GHS-Kriterien, integrierte Dateninterpretation | Eine endgültige Entscheidung wird getroffen, indem Daten aus allen Phasen kombiniert werden | Die genaueste Klassifizierung mit dem Weight of Evidence (WoE) Ansatz |
In unserem Laboratorium, in vivo Wenn der OECD-Test TG 405 unvermeidbar ist, initiieren wir den Test mit einem einzigen Probanden und nehmen nur dann zusätzliche Probanden auf der Grundlage der Ergebnisse auf. Dieses sequentielle Testdesign gewährleistet wissenschaftliche Genauigkeit und hält gleichzeitig die Anzahl der Tiere auf ein Minimum. Darüber hinaus überwachen erfahrene Tierärzte den Test während seiner gesamten Dauer kontinuierlich; Im Falle einer schweren Reaktion wird der Test sofort beendet und eine angemessene analgetische Behandlung verabreicht.
Häufig Gestellte Fragen
| Frage | Antwort |
|---|---|
| Für welche Arten von Produkten ist der OECD-Test TG 405 obligatorisch? | Sie kann unter GHS/CLP-Klassifizierung und REACH-Registrierung für Chemikalien, Pestizide, Biozidprodukte, Reinigungsmittel, Industriechemikalien und alle Gemische, die das Risiko eines Augenkontakts darstellen, erforderlich sein. Da Tierversuche für Kosmetika in der EU verboten sind, in vitro Alternativen sind obligatorisch. |
| Ist es notwendig, TG 405 Tests für eine Substanz mit einem extremen pH-Wert durchzuführen? | Nein. Stoffe mit einem pH-Wert ≤ 2 oder ≥ 11,5 werden ohne Anwendung der OECD TG 405 direkt als "Schwer augenschädigend / ätzend" (Kategorie 1) eingestuft. Dieser Ansatz wurde von der OECD in Auftrag gegeben, um unnötige Verwendung von Tieren zu verhindern. |
| Kann in vitro Testergebnisse als Ersatz für OECD TG 405? | Ja, in vielen Fällen können sie das. Insbesondere validiert in vitro Tests wie BCOP (TG 437) und RhCE (TG 492) können ausreichen, um eine Substanz als "Kategorie 1" (ätzende/ernste Augenschädigung) oder "Nicht-Kategorie 2" (nicht reizend) einzustufen. In einigen Fällen kann jedoch ein In-vivo-Test erforderlich sein, um zwischen Kategorie 2A und 2B zu unterscheiden. in vivo In einigen Fällen kann ein Test erforderlich sein. |
| Wie lange dauert der Test? | In vivo OECD TG 405 Test dauert etwa 3-4 Wochen, einschließlich einer Beobachtungszeit, die bis zu 21 Tage dauern kann. In vitro Alternative Tests hingegen liefern typischerweise Ergebnisse innerhalb von 1-2 Wochen. Einschließlich der Berichterstattung und Qualitätssicherungsprüfung beträgt die Gesamtdauer 4-6 Wochen. |
| In welchen regulatorischen Einreichungen werden die Testergebnisse verwendet? | Sie werden für chemische Sicherheitsbewertungen, die Erstellung von Sicherheitsdatenblättern (SDS) und die Kennzeichnung gemäß den EU-REACH-Vorschriften (Anhänge VII/VIII), der CLP-Verordnung (Nr. 1272/2008), der US-EPA FIFRA, TSCA und den türkischen KKDIK- und SEA-Vorschriften verwendet. |
| Welche Unterlagen müssen dem Labor vor der Prüfung zur Verfügung gestellt werden? | Sicherheitsdatenblatt (SDS) für die Prüfsubstanz, ihre physikalisch-chemischen Eigenschaften (pH, Löslichkeit), verfügbare Toxizitätsdaten, chemische Struktur und Reinheitsinformationen sowie alle zuvor durchgeführten Daten in vitro Prüfergebnisse für Augenreizungen, sofern vorhanden, sind erforderlich. |
Die Augen sind unsere am meisten gefährdeten Organe gegen chemische Gefahren, und diese Empfindlichkeit sollte für jeden verantwortungsbewussten Hersteller wissenschaftlich nachgewiesen werden. Unser Labor ermittelt das Augensicherheitsprofil Ihrer Produkte nach höchsten wissenschaftlichen Standards und in voller Übereinstimmung mit den 3R-Prinzipien unter Verwendung von OECD TG 405 und ergänzenden In-vitro-Alternativtests. Für Ihre Augenreizung und Korrosion Bewertung braucht, Kontaktieren Sie unser GLP-zertifiziertes LaborLassen Sie uns gemeinsam Ihre maßgeschneiderte Teststrategie planen.
