OECD TG 437 / 438 / 492: Göz Irritation için Vitro Alternatiflerinin Karşılaştırma Analizi

Göz tahrişi ve korozyonu değerlendirme, kimyasalların, pestisitlerin, kozmetiklerin ve endüstriyel ürünlerin güvenlik profilinin kritik bir bileşenidir. Geleneksel olarak, bu değerlendirme kullanılarak yapıldı in vivo Testler (OECD TG 405) bir tavşan modelinde; Bununla birlikte, 3R ilkeleri ve bilimsel ilerlemeleri ile paralel olarak, doğrulandı in vitro ve ex vivo alternatifler ön plana geldiler. Bu alternatiflerin en yaygın kullanılanları ise bu alternatiflerdir. OECD TG 437 (BCOP), OECD TG 438 (ICE)Ve OECD TG 492 (RhCE) kılavuzlar.

Son üç yılda, bu üç in vitro/ex vivo Yöntemler laboratuvarımızda yaptığımız göz tahriş çalışmalarının yüzde 70'inden fazlasını dikkate aldı. Özellikle, Avrupa Kozmetik ve kişisel bakım ürünlerinin üreticilerinden taleplerde önemli bir artış gördük. Bu makalede, bu üç yönergenin her birinin bilimsel temelini, pratik uygulamalarındaki farklılıkları ve laboratuvarımızın bu alanda deneyimlerini paylaşacağız.

OECD TG 437: Bovine Corneal Opakity ve Permeability (BCOP) Test

OECD TG 437 Bir şeydir ex vivo Kathanelerden elde edilen bovine gözlerini kullanan test. Testin temel prensibi, izole koreas'ı özel sahiplerine yatırmak ve test maddenini koreal yüzeye uygulamak içerir. Toksik etkiler koreal opaklık (bulutluk) ve permeability ölçülerek değerlendirilir. The The The The The The The The in vitro Bu iki parametreyi birleştirerek elde edilen öfke puanı, maddenin GHS sınıflandırmasını belirlemek için kullanılır.

Laboratuvarda BCOP testi yaparken karşılaştığımız en yaygın meydan okuma, koreal örneklerin tazeliğini koruyor. Katlanma evinden alınan gözler, katliamın ardından ilk dört saat içinde laboratuvara teslim edilmelidir ve koreas bu süre içinde test için izole edilmelidir. Bu lojistik gereksinimi nedeniyle, BCOP testi sadece belirli günlerde ve önceden katliam evi ile koordine ediyoruz. Ayrıca, bovine koreas insan koreas ile yüksek bir yapısal benzerlik paylaşıyor olsa da, koreal kalınlığındaki farklar ve epithelal tabakaların sayısı bazı hassas reaktif sonuçlarla yanlış yönlendirilebilir. Bu tür durumlarda, histopolojik muayeneyi dahil ederek duyarlılığı geliştiriyoruz.

BCOP'un en önemli avantajı, katliamevlerinin bir ürünü olarak elde edildiği için, herhangi bir etik endişe yaratmaz. 2009 yılında OECD tarafından kabul edildi ve 2013 ve 2025 yılında güncellendi. Ancak, test yalnızca koreanın opaklığı ve geçirgenlik parametrelerini ölçer; yırtı filmi, bağışıklık yanıtı ve doku iyileşmesi gibi faktörler modelleyemez. Bu, pestisit formülasyonları gibi karmaşık karışımlardan ciddi göz hasar potansiyelini tahmin etmekle sınırlı olabilir.

OECD TG 438: Evlenmiş Tavuk Göz (ICE) Test

OECD TG 438 Bir şeydir ex vivo Tavuklardan alınan gözleri test edin. Tavuklar gıda tüketimi için katledildiğinden, test hayvanların kullanımını gerektirmez. Test prensibi, izole bir göz bir tutucuya yerleştirmek ve test maddenin koreal yüzeye uygulanması içerir. Zehirli etkiler dört parametreye göre değerlendirilir: koreal opaklık, epithelial hasar (fluorescein tutma), koreal kalınlığı (swelling), ve makrooskopik morfolojik hasar.

Laboratuvarlarımızın ICE testi uygulamasında, özellikle sörfçüler ve alkol bazlı temizlik ürünleri için yüksek doğruluk elde ederiz. Geçen yıl, bir endüstriyel temizlik ürünü üreticisi için yaptığımız ICE çalışmasında, ürünün "Serious Eye Hasar" potansiyelini başarıyla tanımladık (Kategory 1) ve üreticinin formülasyon revizyonunu kolaylaştırdık. Bu durum sadece ICE testinin özellikle sörfçülerle ne kadar etkili olduğunu göstermek için değerlidir.

ICE testi 2009 yılında OECD tarafından kabul edildi ve 2013 ve 2025 yılında güncellendi. En önemli avantajları, koreal şişme gibi fiziksel parametreleri ölçmek ve histopolojik muayene yoluyla duyarlılığı artırmak için potansiyeltir. Bununla birlikte, BCOP gibi, ICE testi sadece sadece kullanır ex vivo doku ve insan biyolojisini tamamen yansıtmıyor; damar ve bağışıklık etkileşimleri modelleyemez.

OECD TG 492: İnsan Corneal-Like Epithelium (RhCE) Test

OECD TG 492 Bir şeydir in vitro Üç boyutlu doku modellerini kullanan test, insan koreal epithelyumunu taklit eder. Bu modeller, koreal epitel epithelial hücrelerden elde edilen doku kültürleridir ve koreal epithelyumun metabolik aktivitesini korur. Test prensibi, test maddenin belirli bir süre için RhCE dokusuna uygulanmasını ve sonra MTT assay kullanarak hücre viability ölçmesini içerir.

RhCE testinin en önemli avantajı budur, çünkü insan hücreleri kullanır, insan biyolojisine doğrudan ekstrapolasyon sağlar. Laboratuvarlarımızda, bu yöntemi birincil tarama testi olarak kullanıyoruz, özellikle kozmetik ve kişisel bakım ürünleri için. Hayvan testleri AB Kozmetik Yönetmeliği altında yasaklandığında, RhCE bu sektör için tek zorunlu seçenektir.

Bununla birlikte, RhCE test modelleri sadece yüzeysel epithelium; daha derin göz yapıları, film dinamikleri veya doku iyileşmesi ile etkileşimleri değerlendiremez. Ayrıca, TG 492 sadece "Requiring Classification" ve "Irritant" arasında ayrım yapamaz; kendi başına "Serious Eye Hasar" (Kategory 1) sınıflandırma için yeterli değildir. Bu nedenle, BCOP veya ICE ile tamamlayıcı testleri, özellikle potansiyel Kategori 1 madde için tavsiye ederiz.

Aşağıdaki tablo, OECD TG 437, TG 438 ve TG 492 yönergelerinin temel özelliklerini karşılaştırmalı bir özet sunar.

Tanımlanmış Yaklaşımlar ve Entegre Test Stratejileri

OECD gelişmiştir Tanımlanmış Yaklaşımlar (DA) Vakalar için tek tek tek tek tek tek bir in vitro Test göz tahrişi değerlendirme için yetersizdir. Bu yaklaşımlar ihtiyacı tamamen azaltmak veya tamamen ortadan kaldırmak için hedefler in vivo Draize testi, farklı sonuçları birleştirerek in vitro Testler. OECD TG 467 altında kabul edilen beş DA var: Sıvılar için DA (DAL-1 ve DAL-2), Solids (DAS), ve Surfactants (DASF) için DA.

Laboratuvarlarımızda, bu DA'ları özellikle karmaşık formülasyonlar için uyguluyoruz. Örneğin, geçen yıl DAL-2 (BCOP + STE) kozmetik üreticinin yeni yüz temizleme jeli için yaklaşımı kullandık. RhCE testi tek başına bir "ruh dışı" sonucu elde ederken, DAL-2 kombinasyonu ürünün "milli sinir bozucu" potansiyelini ortaya koydu, üreticinin formülasyona küçük bir revizyon yapmasına yardımcı oldu. Bu durum, entegre test stratejilerinin tek testlere kıyasla daha güvenilir sonuçlar nasıl sağladığını göstermektedir.

Eye Irritation Testleri Laboratuvarımızda

GLP sertifikalı laboratuvarımızda, OECD TG 437, TG 438 ve TG 492 ile uluslararası standartlara tam uyum içinde göz tahriş testleri yapıyoruz. Tüm üç yöntem için doğrulama sistemleri kullanıyoruz; çünkü ex vivo Testler, taze bovine koreas ve tavuk gözlerini kaynaklıyoruz, oysa in vitro Testler, RhCE modellerini doğruladık.

Test sürecimiz kapsamlı bir ön değerlendirme ile başlar. Test maddenin fizyolojik özellikleri, pH değeri, çözünürlük ve kimyasal yapı incelenir. Bu bilgilere dayanarak, test yöntemlerinin en uygun test yöntemi veya kombinasyonu belirlenir. Test sonuçları GHS kriterlerine göre yorumlanır ve rapor edilir.

Laboratuvarlarımızın önemli avantajlarından biri, çeşitli sunuyoruz in vitro ve ex vivo Entegre bir stratejinin parçası olarak yöntemler. Belirli bir ürün için, en uygun tarama testi ilk olarak yapılır; eğer sonuçlar kesinse veya düzenleyici otoritenin özellikle talep ettiği takdirde, tamamlayıcı testler veya DA'nın kullanılması gerekir. Bu adımlı yaklaşım hem zaman hem de maliyet açısından verimlilik sağlar.

Sık Sorulan Sorular

OECD TG 437, 438 ile ilgili aldığımız en yaygın sorulardan biri ve 492 hangi ürün için uygun. TG 437 (BCOP) sıvı, sağlam ve sallanan formlarda maddeler için uygundur, ayrıca su kaynaklı maddeler. TG 438 (ICE) özellikle sörfçüler, alkoller ve su kaynaklı maddeler için idealdir. TG 492 (RhCE), diğer yandan, kozmetik, kişisel bakım ürünleri ve su kaynaklı maddeler için tercih edilir. Laboratuvarumuz, test maddenin özelliklerini en uygun yöntemi veya DA kombinasyonlarını tavsiye eder.

In vitro Test sonuçları genellikle yerini değiştirip değiştirebilmeleri istenir in vivo Testler. Evet, doğrulandı in vitro Testler ve DA kombinasyonlar sınıflandırmaya ihtiyaç olmadan izin verir in vivo Test. OECD ve EU REACH, bunları tanır in vitro birincil testler olarak yöntemler. Ancak, in vivo Geçerlilik, test sonuçları kesinse veya düzenleyici otoritenin özellikle talep ettiği takdirde gerekli olabilir.

Test süresine gelince, TG 437 ve TG 492 tipik olarak 1-2 hafta içinde sonuçlar verir; TG 438, doku tedariki ve şişme ölçümleri nedeniyle 2-3 hafta sürebilir. Raporlama ve kalite güvencesi incelemesi, toplam süre 3-5 haftadır. Son olarak, soru bu testlerin hangi düzenleyici teslimleri için kullanılabilir. TG 437, 438 ve 492 raporları AB REACH, CLP Yönetmeliği, GHS sınıflandırması, AB Kozmetik Yönetmeliği ve Türk KK gereksinimleri için geçerlidir.

Göz tahriş değerlendirmesinde in vitro ve ex vivo yöntemler, bilimsel doğruluğu etik sorumlulukla birleştiren modern bir yaklaşımın temelini oluşturur. OECD TG 437, TG 438 ve TG 492 standartları ile tam olarak uyumlu olan testlerimiz ile ürünlerinizin en yüksek bilimsel standartlara göre göz güvenliği profilini değerlendiriyoruz.—Hayvan testine gerek kalmadan. GLP sertifikalı laboratuvarımız, doğrulanmış doku modelleri, deneyimli bir ekip ve entegre test stratejileri ile donatılmış, tüm göz tahriş test ihtiyaçlarınız için güvenilir ortağınızdır. Ürüninizin göz güvenliğini göstermek için bizimle iletişime geçin.