OECD TG 437 / 438 / 492: Comparative Analysis of In Vitro Alternatives for Eye Irritation

ويعد تقييم تهيج العينين وتآكلها عنصراً حاسماً في ملامح السلامة للمواد الكيميائية، ومبيدات الآفات، والمواد التجميلية، والمنتجات الصناعية. وتقليديا، أجري هذا التقييم باستخدام in vivo اختبارات (منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي TG 405) في نموذج أرنب؛ غير أنه تم التحقق من صحتها، تمشيا مع مبادئ 3R والتقدم العلمي in vitro و ex vivo والبدائل تأتي إلى المقدمة. The most widely used of these alternatives are the OECD TG 437 (BCOP), منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصاديو OECD TG 492 (RhCE) مبادئ توجيهية.

خلال السنوات الثلاث الماضية هذه الثلاثة in vitro/ex vivo وقد استأثرت الأساليب بأكثر من 70 في المائة من دراسات تهيج العين التي أجريناها في مختبرنا. In particular, following the complete ban on animal testing under the EU Cosmetics Regulation in 2023, we have observed a significant increase in requests from manufacturers of cosmetics and personal care products. وفي هذه المادة، سنتقاسم الأساس العلمي لكل من هذه المبادئ التوجيهية الثلاثة، والاختلافات في تطبيقها العملي، وخبرة مختبرنا الميدانية في هذا المجال.

OECD TG 437: Bovine Corneal Opacity and Permeability (BCOP) Test

OECD TG 437 هو ex vivo الإختبار الذي يَستعملُ قرانَ العيونِ البفينةِ المَحْصُول عليها مِنْ المسلخِ. The basic principle of the test involves placing isolated corneas in special holders and applying the test substance to the corneal surface. وتُقيَّم الآثار السمية من خلال قياس الظلم المرجاني (السمعية) والقدرة على التحمل. The in vitro وتستخدم درجات التهيج، المستمدة من الجمع بين هذين البارامترات، لتحديد تصنيف النظام المنسق عالميا للمادة.

والتحدي الأكثر شيوعا الذي نواجهه عند إجراء اختبار BCOP في مختبرنا هو الحفاظ على طفرة العينات القرنية. ويجب تسليم العينات التي يتم الحصول عليها من المذبح إلى المختبر في غضون الساعات الأربع الأولى بعد الذبح، ويجب عزل الكرونات وإعدادها للاختبار في هذا الإطار الزمني. وبسبب هذه المتطلبات اللوجستية، نحدد اختبار BCOP فقط في أيام محددة، وننسق مع المذبح مقدما. وعلاوة على ذلك، وعلى الرغم من أن البوفين كورنياس تتقاسم درجة عالية من التماثل الهيكلي مع قرنيات الإنسان، فإن الاختلافات في سمك القرنة وعدد الطبقات الوبائية يمكن أن تؤدي إلى نتائج زائفة مقترنة ببعض العناصر الحساسة. وفي مثل هذه الحالات، نعزز الحساسية من خلال إدراج الفحوص المتعاطفة.

The most significant advantage of the BCOP is that, since it is obtained as a byproduct of slaughterhouses, it does not pose any ethical concerns. واعتمدته منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي في عام 2009 وجرى تحديثه في عامي 2013 و 2025. غير أن الاختبار لا يقيس إلا بارامترات الظلم والقابلية للاشتعال في القرنة؛ ولا يمكن أن يكون له عوامل نموذجية مثل الفيلم المسيل للدموع، والاستجابة المناعية، وشفاء الأنسجة. وقد يكون ذلك محدوداً في التنبؤ بإمكانية حدوث ضرر شديد في العين من المخلوطات المعقدة، مثل تركيبات مبيدات الآفات.

OECD TG 438: Isolated Chicken Eye (ICE) Test

OECD TG 438 هو ex vivo الإختبار الذي يستعمل العيون التي تم الحصول عليها من الدجاج وبما أن الدجاج مذبح للاستهلاك الغذائي، فإن الاختبار لا يتطلب استخدام الحيوانات. The principle of the test involves placing the isolated eye in a holder and applying the test substance to the corneal surface. وتُقيَّم الآثار السمية على أساس أربعة بارامترات هي: عدم الاكتراث المرجاني، والضرر الوبائي (احتفاظ الفلورسين)، وزيادة سمك المرجان (السكن)، والأضرار الوبائية الكلية.

وفي تطبيق مختبرنا لاختبار ICE، نحقق درجة عالية من الدقة، لا سيما بالنسبة للمنتجات الأمفيتامينية ومنتجات التنظيف القائمة على الكحول. وفي العام الماضي، وفي دراسة أجراها معهد الطاقة الذرية لصانع منتجات التنظيف الصناعي، نجحنا في تحديد إمكانيات المنتج لـ " ضرر العين السيئ " )الفئة ١( ويس َّر تنقيح الصانع للصياغة. وهذه القضية قيّمة في إثبات مدى فعالية اختبار الإي.

واعتمدت منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي اختبار المعهد في عام 2009 وجرى تحديثه في عامي 2013 و 2025. وتتمثل أهم مزاياها في قدرتها على قياس البارامترات المادية مثل التورم المرجاني وإمكانية تعزيز حساسيتها من خلال الامتحانات التعاطفية. على أي حال، مثل BCOP، اختبار ICE يستخدم فقط ex vivo ولا تعكس الأنسجة تماماً البيولوجيا البشرية؛ ولا يمكنها أن تكون نموذجاً للتفاعلات الوعائية والحصنية.

OECD TG 492: Reconstituted Human Corneal-Like Epithelium (RhCE) Test

OECD TG 492 هو in vitro الاختبار الذي يستخدم عارضات الأنسجة ثلاثية الأبعاد يُقلل من الملحم القرني البشري وهذه النماذج هي ثقافات أنسجة مستمدة من خلايا ملحمية بشرية تحافظ على الهيكل المتعدد المستويات، ومهمة الحاجز، والنشاط الأيضي في الملحم القرني. The principle of the test involves applying the test substance to the RhCE curriculum for a specific period of time and then measuring cell viable using the MTT assay.

The most significant advantage of the RhCE test is that, because it uses human cells, it allows for direct extrapolation to human biology. وفي مختبرنا، نستخدم هذه الطريقة كفحص أولي، لا سيما لمنتجات التجميل والرعاية الشخصية. وبما أن اختبارات الحيوانات محظورة بموجب لائحة الاتحاد الأوروبي المتعلقة بالمستحضرات التجميلية، فإن الشبكة هي الخيار الإلزامي الوحيد لهذا القطاع.

ومع ذلك، فإن نماذج اختبار " RhCE " لا تعدو أن تكون ملحمية سطحية؛ ولا يمكنها تقييم التفاعلات مع هياكل أعمق للعين، أو ديناميات الأفلام المسيل للدموع، أو شفاء الأنسجة. وعلاوة على ذلك، لا يمكن أن يميز TG 492 إلا بين تصنيف " لا يتطلب " و " مثير للقلق " ؛ فهو لا يكفي وحده لتصنيف " ضرر العين المريعة " (الفئة 1). ولذلك، نوصي بإجراء اختبارات تكميلية مع شركة BCOP أو ICE، ولا سيما فيما يتعلق بالمواد المحتملة من الفئة 1.

ويقدم الجدول الوارد أدناه موجزا مقارنا للملامح الرئيسية لمجموعة التعاون التقني التابعة لمنظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي 437 و 438 و 492 من المبادئ التوجيهية.

النهج المحددة واستراتيجيات الاختبار المتكامل

طورت منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي النُهج المحددة في الحالات التي تكون فيها واحدة in vitro الاختبار غير كاف لتقييم تهيج العين. وتهدف هذه النهوج إلى الحد من الحاجة إلى ذلك أو القضاء التام عليه in vivo اختبار التجفيف عن طريق الجمع بين نتائج مختلفة in vitro اختبارات There are five DAs accepted under OECD TG 467: DAs for Liquids (DAL-1 and DAL-2), DAs for Solids (DAS), and DAs for Surfactants (DASF).

وفي مختبرنا، نطبق هذه الأجهزة، لا سيما في التركيبات المعقدة. فعلى سبيل المثال، استخدمنا في العام الماضي نهج " دال-2 " (BCOP + STE) لجيل جديد للتطهير الوجهي لصانع التجميل. وفي حين أن اختبار " RhCE " قد أسفر وحده عن نتيجة " عدم الازعاج " ، كشفت مجموعة دال-2 عن قدرة المنتج على " الغضب المبتسم " ، مما أدى بنا إلى مساعدة الصانع على إجراء تنقيح طفيف للصيغة. وتبين هذه الحالة الكيفية التي توفر بها استراتيجيات الاختبار المتكاملة نتائج أكثر موثوقية مقارنة بالاختبارات الوحيدة.

إجراء اختبارات لري العين في مختبرنا

ونجري في مختبرنا المصدق على مشروع GLP اختبارات تهيج العينين تغطيها مجموعة TG 437، و TG 438، و TG 492 في امتثال تام للمعايير الدولية. نحن نستخدم أنظمة اختبار مصدق عليها من أجل الطرق الثلاثة ex vivo فحوصات، نُصدر قرينة جديدة و عيون دجاج، بينما in vitro الإختبارات، نستخدم نماذج مثبتة

وتبدأ عملية اختبارنا بتقييم أولي شامل. وتُدرس الخواص الفيزيائية الفيزيائية الفيزيائية للمادة الاختبارية، والقيمة الهيدروجينية، والقابلية للذوبان، والهيكل الكيميائي. واستناداً إلى هذه المعلومات، تحدد أنسب طريقة اختبار أو مزيج من أساليب الاختبار. وتُفسَّر نتائج الاختبار وتُبلَّغ عنها وفقاً لمعايير الصحة العامة.

ومن مزايا مختبرنا الرئيسية أننا نقدم مختلف in vitro و ex vivo (ب) الأساليب كجزء من استراتيجية متكاملة. وبالنسبة لمنتج معين، يجري اختبار الفرز الأنسب أولاً؛ وإذا كانت النتائج غير حاسمة أو إذا طلبت الهيئة التنظيمية ذلك تحديداً، تُستخدم الاختبارات التكميلية أو DA. ويكفل هذا النهج المتدرج الكفاءة من حيث الوقت والتكاليف على السواء.

الأسئلة الشائعة

ومن بين أكثر الأسئلة شيوعا التي نتلقىها فيما يتعلق بالوثيقة TG 437 و438 و492 التي وضعتها منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي الاختبار المناسب للمنتج. TG 437 (BCOP) is suitable for substances in liquid, solid, and paste forms, as well as water-insoluble substances. TG 438 (ICE) is particularly ideal for surfactants, alcohols, and water-soluble substances. أما TG 492 (RhCE)، فيفضل من ناحية أخرى على مواد التجميل، ومنتجات الرعاية الشخصية، ومواد حل المياه. مختبرنا يُقيّمُ خواصَ مادةِ الإختبارِ لتوصية الطريقة الأنسبِ أَو تركيبة DA.

في المختبر وكثيراً ما تُسأل نتائج الاختبار عما إذا كان يمكن أن تحل محلها in vivo اختبارات نعم، مصدق عليه in vitro الاختبارات والجمعيات الإدارية تسمح بالتصنيف دون الحاجة in vivo اختبار. وتعترف منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي والاتحاد الأوروبي لمنطقة المحيط الهادئ بهذه in vitro طرق كاختبارات أولية ومع ذلك، in vivo وقد يتطلب الأمر التحقق إذا كانت نتائج الاختبار غير حاسمة أو إذا طلبت الهيئة التنظيمية ذلك تحديداً.

وفيما يتعلق بمدة الاختبار، عادة ما تسفر المادتان 437 و492 من القانون الجنائي عن نتائج في غضون فترة تتراوح بين أسبوع واحد وأسبوعين؛ غير أن الفريق التقني قد يستغرق ما بين أسبوعين وثلاثة أسابيع بسبب شراء الأنسجة وقياسات التورم. ويشمل ذلك استعراض الإبلاغ وضمان الجودة، يبلغ مجموع المدة 3-5 أسابيع. وأخيراً، يثور سؤال بشأن ما يمكن استخدامه في العروض التنظيمية لهذه الاختبارات. TG 437, 438, and 492 reports are valid for EU REACH, the CLP Regulation, GHS classification, the EU Cosmetics Regulation, and Turkish KKDIK requirements.

وفي أساليب اليقظة في تقييم تهيج العينين تشكل أساس نهج حديث يجمع بين الدقة العلمية والمسؤولية الأخلاقية. مع اختباراتنا، التي تمتثل امتثالاً تاماً لمعايير منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي TG 437، TG 438، و TG 492، نقيّم نبذة السلامة من الأوعية لمنتجاتك إلى أعلى المعايير العلمية—بدون الحاجة لاختبار الحيوانات مختبرنا المصدق على (جي بي) مجهز بنماذج أنسجة مصدق عليها فريق ذو خبرة واستراتيجيات اختبار متكاملة هو شريكك الموثوق به اتصلوا بنا لإظهار سلامة المنتج.