Qu'est-ce que le test de mutation génétique de cellules de mammifères in vitro (HPRT/MLA)?

La mutation génétique des cellules des mammifères in vitro Le test est l'un des tests de génotoxicité fondamentaux effectués pour évaluer le potentiel d'une substance à causer des mutations génétiques dans les cellules de mammifères. Menées conformément aux lignes directrices de l'OCDE TG 476 et TG 490, ces études servent à déterminer si les substances testées provoquent des changements génétiques permanents au niveau de l'ADN.

Largement utilisé dans les évaluations de l'innocuité des produits pharmaceutiques, des produits biocides, des dispositifs médicaux, des matières premières cosmétiques, des produits chimiques industriels et des substances nouvellement mises au point, ce test est un élément clé des études de toxicologie génétique.

Chez NanoTox, au sein de notre Unité de Toxicologie Génétique, nous offrons des services de test de mutation génétique cellulaire in vitro qui respectent les principes BPL (Bonnes pratiques de laboratoire) et les normes internationales.

Objet du test de mutation génétique de cellules de mammifères in vitro

Ce test vise à déterminer un potentiel de substance pour induire des mutations au niveau des gènes dans les cellules de mammifères.

Grâce à ces études:

• Le potentiel mutagène est évalué,
• Les modifications génétiques associées aux dommages causés par l'ADN sont étudiées,
• Les données de sécurité génétique sont obtenues,
• Les exigences réglementaires sont respectées,
• Les évaluations des risques pour la santé humaine sont appuyées.

Les résultats obtenus contribuent à l'établissement de profils de risque génotoxiques de produits.

Quels sont les tests HPRT et MLA?

Deux méthodes différentes sont couramment utilisées dans les évaluations in vitro des mutations génétiques de cellules de mammifères:

Essai HPRT (OCDE TG 476)

Le test HPRT (Hypoxanthine-Guanine Phosphoribosyl Transferase) vise à détecter des mutations survenant dans une région génique spécifique dans des cellules de mammifères. Cette méthode est une méthode de test fiable qui est utilisée depuis de nombreuses années, en particulier dans l'évaluation des mutations génétiques.

Essai MLA (OCDE TG 490)

Le MLA (Mouse Lymphoma Assay) est une méthode avancée appliquée aux cellules de lymphome de souris qui permet de détecter non seulement les mutations génétiques, mais aussi les changements chromosomiques mineurs.

Ces deux méthodes figurent parmi les principaux tests de génotoxicité acceptés par les autorités réglementaires internationales.

Études réalisées en conformité avec le TG 476 de l'OCDE et les lignes directrices du TG 490 de l'OCDE

Les études réalisées à NanoTox sont conformes aux lignes directrices de l'OCDE suivantes :

• TG 476 de l'OCDE – Essais de mutation génétique de cellules de mammifères in vitro utilisant les gènes Hprt et xprt
• OCDE TG 490 – Essais de mutation du gène de la kinase de la thymidine

En vertu de ces lignes directrices :

• Des lignes cellulaires appropriées sont utilisées,
• Les contrôles positifs et négatifs sont évalués,
• Les systèmes activés et non activés par métabolisme sont appliqués,
• Les relations dose-réponse sont analysées,
• La cytotoxicité et la fréquence des mutations sont évaluées ensemble.

Principe d'essai

Au cours de l'essai, les cellules de mammifères sont exposées à la substance d'essai à différentes concentrations. Après l'exposition, les mutations génétiques sont évaluées dans des milieux de culture sélective et la fréquence des mutations est calculée.

Les lignées cellulaires fréquemment utilisées dans les études comprennent :

• cellules CHO,
• cellules V79,
• L5178Y cellules de lymphome de souris,
• Cellules TK6

entre autres.

De plus, le système d'activation métabolique S9 peut être utilisé pour imiter le métabolisme des mammifères.

Paramètres évalués dans la portée de l'essai

Dans le cadre du test de mutation génétique de cellules de mammifères in vitro :

• Fréquence de mutation,
• relation dose-réponse,
• Évaluation de la cytotoxicité,
• Viabilité des cellules,
• Effets de l'activation métabolique,
• Analyses statistiques

sont examinés.

Ces évaluations démontrent scientifiquement le potentiel de mutation génétique de la substance testée.

Études de toxicologie génétique fiables avec NanoTox

NanoTox conduit Dans Vitro Mammalian Cell Gene mutation tests conformément au TG 476 de l'OCDE et au TG 490 de l'OCDE, en respectant les normes de qualité internationales, grâce à son équipe de toxicologie génétique experte et une infrastructure de laboratoire avancée. Nous assurons l'acquisition de données de génotoxicité fiables requises dans les processus de développement des produits pharmaceutiques, des dispositifs médicaux, des produits biocides et des substances chimiques.

Pour obtenir des renseignements détaillés sur la mutation génétique des cellules des mammifères in vitro (RTHP / LPM) Test et nos autres services de toxicologie génétique, veuillez contacter NanoTox.