Akut İnhalasyon Toksikliği Test

OECD TG 403, OECD TG 433 ve OECD TG 436

Akut Inhalation Toxicity: Respiratory Hazards Bilimsel ve Düzenleme

İnhalasyon, gazlar, vazolar, aerosoller, tozlar ve mistler doğrudan solunum yolu ile etkileşime girebilirler. Test makalesinin fizykokimyasal özelliklerine bağlı olarak, ayrıştırıcı desen, çözünürlük, reaktivite ve tespit, inhalasyon maruziyeti yerel solunum etkilere, sistemik toksisiteye veya her ikisine de neden olabilir. Bu nedenle, inhalasyon ilgili bir maruz kalma rotası olduğunda akut inhalasyon toksisite çalışmaları kullanılır ve geçerli düzenleyici veri gereksinimi mevcut bilgi, alternatif yöntemler, okuma-across veya kabul edilen bir feragat tarafından uygun şekilde ele alınamaz.

Uygun akut inhalasyon testi yönteminin seçimi bilimsel olarak haklılanmalı ve düzenleyici amacı yansıtmalıdır, mevcut toksisite bilgileri, beklenen insan maruziyeti, test makalesinin fiziksel formu, uygun bir atmosfer ve yedekleme ilkelerini (Rs). Mevcut OECD TG 403 özellikle geleneksel TG 403 çalışması yapmadan önce mevcut bilgi ve daha rafine akut inhalasyon yaklaşımlarını dikkate almaktadır. Sınıflama ve etiketleme ana düzenleyici hedeftir, OECD TG 436 genellikle TG 403 tarafından, alınan otoritenin ihtiyaçlarına tabidir.

Akut Inhalation Toxicity Testinin Bilimsel Basis

Akut inhalasyon toksisite testi kısa süreli inhalasyon maruziyetinden sonra ortaya çıkan olumsuz etkileri değerlendirmektedir. İlgili son nokta, seçilen OECD Test Kılavuzuna bağlıdır. Kesin bir LC50 veya diğer nicel konsantrasyon-response tahmini, OECD TG 403 ile temel olarak ilişkilendirilmektedir. OECD TG 433, temel karar noktası olarak belirgin toksisite kullanırken, OECD TG 436, hangi ölüm veya moribundity önceden tanımlanmış konsantrasyon seviyeleri arasında ilerlemeyi belirleyen bir adımlı akut Toksik Sınıf prosedürü kullanır.

Inhaled material, alveoli'den sistemik dolaşıma doğrudan ve hızlı bir şekilde geçmemektedir. Respiratory traksiyon ve absorpsiyon, aerodinamik parçacık büyüklüğü, vazo basıncı, su ve lipid çözünürlük, reaktivite, bölgesel ayrıştırma, mukocilitasyon ve alveolar izni gibi faktörlere bağlıdır. Sonuç olarak, akut inhalasyon çalışması hem yerel solunum toksisitesi ve sistemik toksisite için tamamen sistemli bir test olarak yorumlanmalıdır.

OECD Inhalation Test Kılavuzları: Doğru Düzenleme

OECD TG 403 - Akut Inhalation Toxicity

OECD TG 403 iki ayrı çalışma tasarımı içerir: Geleneksel LC50 protokolü ve Concentration × Time (C × t) protokolü. Geleneksel protokol genellikle sabit bir maruz kalma dönemi kullanır, normalde 4 saat ve ana çalışmada en az üç konsantrasyon seviyesi. Temel bir çalışma genellikle konsantrasyon başına beş erkek ve beş kadın ile yapılır veya bu susceptability bilinen daha hassas seks beş hayvandır. Tasarım, sağlam bir sayısal konsantrasyon-response ilişkisi oluşturmak ve LC50 ve diğer lethality tahminlerini güven sınırları ile sağlamak amaçlanmıştır.

C × t protokolü de OECD TG 403'ün bir parçasıdır. Hayvanları çeşitli konsantrasyon seviyelerinde ve birden fazla maruz kalma süresine maruz bırakıyor, normalde bir burun sistemi kullanıyor. Bu yaklaşım, bir düzenleyici veya bilimsel ihtiyaç, farklı maruz kalma süresi boyunca toksisiteyi karakterize etmek için seçilebilir, örneğin acil soru veya arazi kullanımı planlamasında. Bir OECD TG 436 prosedürü değil.

OECD TG 433 - Akut Inhalasyon Zehiri: Sabit Yoğunlaştırma Prosedürü

OECD TG 433, Sabit Yoğunlaşma Prosedürü (FCP). Merkezi rafinerisi, amaçlanan son nokta olarak ölüm veya moribundity yerine belirgin toksisite kullanımıdır, konsantrasyonlardan kaçınılması veya işaretli acı ve sıkıntıya neden olması beklenir. Prosedür adımlı ve önceden tanımlanmış sabit konsantrasyonları gazlara, vazolara veya aerosollere uygun şekilde kullanır. Bir görüş çalışması en hassas seks ve uygun bir başlangıç konsantrasyonunu tanımlamak için kullanılabilir. Ana çalışma normalde her bir konsantrasyon seviyesinde bir seks yapan beş hayvan kullanır, görme çalışmasında kullanılan hayvanlara ek olarak.

4 saatlik bir maruziyet önerilir, ancak diğer süreler belirli düzenleyici gereksinimler için gerekli olabilir. Yöntem öncelikle LC50'nin kesin bir tahmini oluşturmak yerine akut toksisite tehlikesi değerlendirme ve sınıflandırmayı desteklemek amaçlanmıştır.

OECD TG 436 - Akut Inhalation Toxicity: Akut Toksik Sınıf Yöntemi

OECD TG 436, Akut Toksik Sınıf (ATC) yöntemidir. Her adımın her seksin üç hayvanını kullandığı bir adım sınıflandırma prosedürü, tercih edilen türler olarak sıçanla. Hayvanlar, GHS akut inhalasyon toksisite kategorilerine ait sabit seviyelerden seçilen önceden tanımlanmış bir konsantrasyona maruz kalıyorlar. Bir adımdaki test ile ilgili ölüm veya moribundity varlığı veya yokluğu bir sonraki adımı belirler.

TG 436 bu nedenle bir konsantrasyon × zaman yöntemi değildir ve birincil karar uç noktası olarak belirgin toksisite kullanmıyor. Asıl amacı, klasik bir sayısal LC50 tasarımından daha az hayvan kullanarak tehlike sınıflandırmasıdır.

OECD Akut İnhalasyon Yaklaşımlarının Karşılaştırması

Test Atmosphere

İnhalasyon atmosferinin nesli ve karakterizasyonu geçerliliği incelemek için merkezidir. Test edilen fiziksel form test makalesinin fizyotik özelliklerini yansıtmalıdır ve bununla ilgili olarak, işlem veya kullanım sırasında muhtemelen karşılanacaktır. Gazlar ve vapourlar, dillem veya buharlaşma tarafından oluşturulabilir, ancak tozlar ve sıvı aerosoller istikrarlı ve yeniden uygulanabilir bir atmosfer üretebilecek uygun nesil sistemler gerektirir.

Actual test-article konsantrasyonu, uygun doğrulama veya bilimsel olarak haklı analitik bir yöntem kullanarak hayvanların nefes bölgesinde belirlenmelidir. OECD TG 403 için, maruz kalma atmosferi pratik olarak sabit tutulmalıdır. Intermittent örnekleme 4 saatlik bir çalışmada kullanılırken, en az iki oda örneği genellikle beklendiği gibi, önemli yetimlerin gözlemlendiği takdirde daha fazla örnekle yapılır. Bireysel konsantrasyon örnekleri genellikle sıvı veya katı aerosoller için% 10'dan fazla ±10'dan fazla oda konsantrasyonundan sapmamalıdır.

OECD TG 433 için, gerçek konsantrasyon da nefes bölgesinde ölçülmektedir. Intermittent örnekleme kullanıldığında, kılavuz, mümkün olan yaklaşık saatlik aralıklarla en az beş örneği belirtir. Gazlar/vapours için aynı ±10% kriteri ve ±20% kriteri sıvı / katı aerosoller için geçerli bireysel oda konsantrasyon örnekleri anlamına gelir.

Aerosol Parçacık-Size Karakterizasyon

Parçacık büyüklüğü karakterizasyonu, aerodinamik parametreleri kullanarak ifade edilmelidir, sadece nominal boyuttaki partiküllerin yüzdesi olarak değil. OECD TG 403'te, 1-4 μm'nin kütleli bir aerodinamik çapı (MMAD) ile aerosoller ve 1.5-3.0'ın geometrik bir sapması (GSD) solunum yolu ile ilgili bölgelerin maruz kalması önerilir. Parçacık büyüklüğündeki dağıtım her 4 saatlik maruziyet sırasında en az iki kez belirlenmelidir.

OECD TG 433'te, bir FD of 1.0-3.0 ile bir ≤4 μm aerosol MMAD tavsiye edilir ve parçacık büyüklüğü dağılımı da her 4 saatlik maruziyet sırasında en az iki kez belirlenmelidir. Önerilen parçacık büyüklüğünden bilimsel olarak haklı sapma, çalışma belgelerinde açıklanmalıdır.

Exposure Systems: Nose/Head-Only ve Whole-Body

Her iki burun / sadece ve tüm maruz kalma sistemleri test makalesi, çalışma tasarımı ve düzenleyici amacına bağlı olarak uygun olabilir. Nose/head-Only systems can reduce non-inhalasyon maruziyeti azaltılabilir ve genellikle inhaled atmosfer üzerinde sıkı kontrol sağlayabilir, ancak kısıtlamalar stres tanıtabilir ve dikkatli bir acclimatizasyon ve izleme gerektirir. Tüm vücut sistemleri kısıtlamadan kaçınır, ancak test-article tüketimini artırabilir ve kürkte ayrıştırmadan sonra dermal maruziyeti veya oral maruziyetine izin verebilir.

Buna göre, burun sadece maruz kalma, dermal veya oküler maruz kalmanın tamamen önlenmesi olarak tanımlanabilir. Daha doğru bir açıklama, inhalasyon rotaları tarafından en aza indirilmesidir.

GHS ve AB CLP Akut İnhalasyon Toksikliğinin Sınıflandırılması

Akut inhalasyon toksisite sınıflandırması, test materyalinin fiziksel formuna ve 4 saatlik akut toksisite tahminine (ATE) veya eşdeğer LC50 bilgilerine bağlıdır. AB CLP için, Kategoriler 1-4 kullanılır. UN GHS ayrıca Seçmeli bir Kategori 5 içerir, ancak Kategori 5 AB CLP altında akut toksisite kategorisi değildir.

Not: Gösterilen sayısal kriterler AB CLP akut inhalasyon toksisite kategorileridir 4 saatlik maruziyet için. Diğer yetkiler için, uygulanabilir GHS baskı ve ulusal/bölgesel uygulama kontrol edilmelidir.

Bir Düzenlemesel Akut İnhalasyon Çalışmasının Yapılması

Bilimsel olarak defensible akut inhalasyon programı normalde test kimliği ve kompozisyonu, saflık, fizykokimyasal özellikleri, volumability/patlanabilirlik, mevcut toksikoloji verileri, beklenen kullanım ve maruziyet ve atmosfer ölçümü için analitik yöntem ile başlar.

Teknik fizibilite, hayvan maruziyetinden önce gösterilmelidir. Bu, amaçlanan atmosferin, istikrar ve homojenitenin onaylanması, hayvanların nefes alanında uygun örnekleme ve hava akışı, sıcaklık, göreceli nem, oksijen ve karbon dioksit gibi çevresel koşulların kabul edilebilir aralıklarda kalmasını içerir.

Ve maruz kaldıktan sonra, hayvanlar seçilen kılavuzlara göre mortalite ve toksisite belirtileri için değerlendirilir. Vücut ağırlıkları belirtilen aralıklarda kaydedilir. Post-exposure gözlem genellikle yaklaşık 14 gün boyunca devam eder, başlangıç, kalıcılık veya toksik etkilerin kurtarılmasında kesin süre ayarlanır. Tüm hayvanlar geçerli kılavuz tarafından gerekli olan brüt nekropsy'ye maruz kalıyor; histopolojik muayene, lezyonlar, çalışma hedefleri veya düzenleyici gereksinimler tarafından belirtildiğinde uygun olabilir.

Düzenlemeler için, çalışma, alınan otorite tarafından gerekli olan uygun Good Laboratory Practice (GLP) çerçevesinde yapılmalıdır. Son rapor açıkça hedef, nominal ve gerçek konsantrasyonları ayırt etmelidir, atmosfer-jenerasyon ve analitik yöntemler sağlar, aerosoller için sayısal veriler, bireysel-hayal gözlemler ve vücut ağırlıkları rapor eder, nekropsi bulguları tanımlar ve seçilen çalışma tasarımına uygun istatistiksel analiz sağlar.

Sık Sorulan Sorular

Tüm gazlar, vazolar, aerosoller, tozlar veya uçucu sıvılar otomatik olarak akut inhalasyon çalışması gerektirir mi?

Hayır. Test ihtiyacı, uygulanabilir düzenleyici çerçeveye, insan maruziyetinin beklenen rotasına, mevcut akut toksisite bilgilerine, fizykokimyasal özelliklere ve kabul edilen adaptasyonlara, okumalara, alternatif yöntemlere veya feragatlere bağlıdır. Test, her inhalable materyal için evrensel olarak zorunlu olarak sunulmamalıdır.

Hangi OECD rehberi sadece GHS sınıflandırma ve etiketleme gerektiğinde seçilmelidir?

Mevcut OECD TG 403, TG 436'nın genellikle sınıflandırma ve etiketleme için bilgi verildiğinde genel olarak tavsiye edilir. TG 433, Sabit Yoğunlaşma Prosedürünün ve belirgin-oksisite uç noktasının düzenleyici amacı ile buluştuğu yerde de uygun olabilir. Son seçim, alınan otoritenin gereksinimlerine karşı haklı olmalıdır.

OECD TG 403 uygun olduğunda?

TG 403, nicel bir konsantrasyon-response ilişkisi olduğunda, LC50/LCx veya birden fazla maruz kalma süresi üzerindeki konsantrasyon süresi gibi bir nokta tahmin bilimsel olarak veya düzenleyici olarak gereklidir. TG 403, daha rafine bir yaklaşım veri gereksinimini karşılayabilirken otomatik olarak kullanılmamalıdır.

TG 433 veya TG 436'dan kesin bir LC50 hesaplanabilir mi?

Bu yöntemler esas olarak sınıflandırma prosedürleridir ve LC50'nin geleneksel TG 403 sayısal tasarım olarak aynı kesin noktası tahminini oluşturmak için tasarlanmamıştır. Karar şemalarına göre akut inhalasyon tehlike kategorilerini atamak için yeterli bilgi sağlarlar.

Akut inhalasyon çalışması ne kadar sürer?

Hayvan aşaması normalde yaklaşık 14 günlük bir gözlem dönemi takip edilen maruziyeti içerir. Toplam proje süresi test karakterizasyonu, analitik yöntem hazırlığı, atmosfer-evlilik, çalışma zamanlaması, patoloji gereksinimleri, veri incelemesi, QA inceleme ve son raporlamaya bağlıdır. Sabit bir evrensel dönüş süresi, çalışma özel onayı olmadan belirtilmemelidir.

Düzenleme Sonuç

Akut inhalasyon toksisitesi değerlendirme tek bir varsayılan yöntemden ziyade gerçek düzenleyici soru etrafında tasarlanmalıdır. OECD TG 403 nicel Geleneksel LC50 ve C × t seçenekleri sunar; OECD TG 433 belirgin toksisitede sabit bir konsensasyon Prosedürü merkezi sağlar; ve OECD TG 436, önceden tanımlanmış konsantrasyonlar ve mortalite/moribunditeye dayanan akut bir toksik sınıf prosedürü sunar. Doğru yöntem seçimi, teknik olarak kontrollü atmosfer nesli, kılavuz-kompli aerosol karakterizasyonu ve GHS/CLP kriterlerinin doğru yorumu bilimsel olarak geçerli ve düzenleyici bir çalışma için gereklidir.

Yazarlar

1. OECD (2024). Test No. 403: Akut Inhalation Toxicity. Kimyasalların Testi için OECD Kılavuzları, Bölüm 4. 25 Haziran 2024. DOI: 10.1787/9789264070608-en. Link
2. OECD (2018). Test No. 433: Akut Inhalation Toxicity: Sabit Yoğunlaşma Prosedürü. Kimyasalların Testi için OECD Kılavuzları Bölüm 4. DOI: 10.1787/9789264284166-en. Link
3. OECD (2009). Test No. 436: Akut Inhalation Toxicity – Akut Toksik Sınıf Yöntemi. Kimyasalların Testi için OECD Kılavuzları Bölüm 4. DOI: 10.1787 /9789264037-en. Link
4. OECD (2018). Inhalation Toxicity Studies - Second Edition. OECD Serisi No. 39. DOI: 10.1787/fba59116-en. Link
5. Avrupa Parlamentosu ve Konsey. Yönetmelik (EC) Hiçbir 1272/2008 maddelerin ve karışımların etiketlenmesi ve paketlemesi (CLP), Ek I, Bölüm 3.1 - Akut Toksikity. Link
6. Avrupa için Birleşmiş Milletler Ekonomik Komisyonu (UNECE). Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemical (GHS), 11. revize edilmiş baskı. Link