Akut Oral Zehir Testi: OECD TG 420, 423 ve 425

Akut Oral Toxicity Değerlendirme için Appropriate OECD Yaklaşımını Seçin

Akut oral toksisite testi, kimyasalların ve diğer düzenlenmiş test maddelerinin klinik olmayan güvenlik değerlendirmesinin önemli bir bileşenidir. Bu, kısa bir süre içinde gerçekleşen tek bir oral maruziyet veya birden fazla maruziyetin ardından meydana gelebilecek olumsuz etkiler hakkında bilgi sağlar ve tehlike tanımlama, sınıflandırma ve düzenleyici risk değerlendirmelerine katkıda bulunabilir.

Tarihsel olarak, akut oral toksisite değerlendirme, sayısal bir median lethal dozunın (LD50) belirlenmesi ile güçlü bir şekilde ilişkilendirildi. Modern OECD yaklaşımları, yalnızca kesin bir LD50 oluşturmak için çok sayıda hayvanın rutin kullanımından uzaklaşmıştır. Bunun yerine, mevcut OECD yöntemleri, tehlike değerlendirme ilkelerine dahil ederken gerekli bilgileri elde etmek için tasarlanmıştır. Azım ve Refinement Hayvan kullanımı.

In vivo akut oral toksisite değerlendirmesi için kullanılan üç önemli OECD Testi Kılavuzu şunlardır:

• OECD TG 420 — Akut Oral Zehir: Sabit Dose Prosedürü
• OECD TG 423 — Akut Oral Zehir: Akut Toksik Sınıf Yöntemi
• OECD TG 425 — Akut Oral Zehir: Up-and-Down Prosedürü

Her üç yöntem akut toksisiteyi oral yönetimden sonra değerlendirmesine rağmen, değiştirilemez değiller. Deney tasarımları, karar kriterleri ve beklenen çıktıları farklı ve uygun yöntemin seçimi çalışmanın düzenleyici amacına ve test öğeyle ilgili mevcut bilgilere dayanarak olmalıdır.

Akut Oral Zehir Nedir?

Akut oral toksisite, bir maddenin tek bir oral dozunu takip eden veya kısa bir süre içinde verilen çoklu oral dozları takip eden olumsuz etkiler ifade eder.

Akut oral toksisite bilgileri destekleyebilir:

• akut toksik tehlikelerin tanımlanması;
• sınıflandırma ve etiketleme;
• akut toksik bir aralığın tahminleri;
• Kullanımı için uygun önlemler seçimi;
• Daha geniş kimyasal güvenlik ve risk değerlendirmesi;
• akut oral toksisite bilgisinin gerekli olduğu düzenleyici başvurular.

Oluşturulan bilgiler sınıflandırmayı destekler Küresel olarak Kimyasalların Sınıflandırılması ve Etiketlenmesi Sistemi (GHS) veya yargısal sistemler GHS prensiplerini uygular.

Geçerli düzenleyici gereksinimi yine de belirli madde, ürün kategorisi ve yetki için değerlendirilmelidir.

Neden Üç Farklı OECD Akut Oral Zehir Yöntemleri Var?

OECD TG 420, TG 423 ve TG 425, tarihsel geleneksel LD50 yaklaşımına güvenerek bilimsel olarak faydalı akut toksisite bilgileri üretmek için geliştirildi.

Uygun yöntem büyük ölçüde gerekli bilgi türüne bağlıdır.

OECD Rehberlik Belgesi Akut Oral Toxicity testi, hangi yöntemin belirli bir düzenleyici amaç için en uygun olduğunu belirlemede dikkate alınmalıdır.

OECD TG 420: Sabit Dose Prosedürü

Prensip Prensibi

OECD TG 420, Sabit Dose Prosedürü (FDP).

Onun ayırt edici özelliği, yöntemin özellikle tanımlamak için vurgulanmasıdır. toksisite belirtileri Ölümleri birincil uç noktası olarak kullanmak yerine.

Normal olarak kullanılan sabit doz seviyeleri şunlardır:

• 5 mg/kg vücut ağırlığı
• 50 mg/kg vücut ağırlığı
• 300 mg/kg vücut ağırlığı
• 2000 mg/kg vücut ağırlığı

5000 mg/kg'lık olağanüstü doz sadece kılavuzda açıklanan koşullar altında kabul edilebilir.

Yöntem öncelikle sıçanlarda ve tek bir cinsiyetin hayvanlar için tasarlanmıştır, normalde kadınlar genellikle kullanılır.

Sighting Study

Ana çalışmadan önce, uygun bir başlangıç dozu seçmeye yardımcı olmak için bir görüş çalışması yapılır.

Hedef, gereksiz toksisiteye veya ölüme neden olan gereksiz toksisiteye veya ölüme neden olmayan bir toksisite kanıtı üretmek için beklenen bir doz tanımlamaktır.

Başlangıç dozu seçimi, mevcut olan test materyali ile ilgili tüm mevcut bilgileri içermelidir:

• fizykokimyasal özellikler;
• yapısal ilişkiler;
• Mevcut in vitro veya in vivo bilgi;
• İlgili maddeler hakkında bilgi;
• beklenen insan maruziyeti;
• Mevcut toksikolojik bilgiler.

Main Study

Hayvanlar daha sonra görüş çalışması sonucunda uygun sabit bir dozda tedavi edilir.

Daha yüksek veya daha düşük sabit bir dozda daha fazla test, gözlemlenen toksisite veya mortaliteye bağlı olarak gerekli olabilir.

Toplam bir toplamı Bir seksin beş hayvanı normalde her doz seviyesinde araştırılacakAncak, OECD kılavuzuna göre.

TG 420 özellikle kullanışlı olduğunda?

TG 420, düzenleyici hedef öncelikle uygun olabilir akut toksisite sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma sınıflandırma Ve belirgin bir toksisite üreten bir doz tanımlamak yeterli bilgi sağlar.

Yöntemlerin aksine, temel olarak mortaliteye odaklandı, Sabit Dose Prosedürü doğrudan karar sürecine bağlı olarak toksisite belirtileri içerir.

OECD TG 423: Akut Toksik Sınıf Yöntemi

Prensip Prensibi

OECD TG 423, Akut Toksik Sınıf Yöntemi.

Bu, bir adımlı prosedürdür ki Tek bir seksin üç hayvanı her adımda kullanılır.

Ön tanımlanmış doz seviyeleri genellikle:

• 5 mg/kg vücut ağırlığı
• 50 mg/kg vücut ağırlığı
• 300 mg/kg vücut ağırlığı
• 2000 mg/kg vücut ağırlığı

Daha yüksek veya daha düşük bir dozda ilerleme, önceki adımda tedavi edilen hayvanlarda görülen ölüm ve / veya moribund durumuna bağlıdır.

OECD rehberi, sonuca bağlı olarak, yaklaşık ortalama yaklaşık bir ortalamanın bunu göstermektedir. İki ila dört adım Gerekli olabilir.

Önemli olarak, TG 423 bu nedenle bir şeydir group-sequential method. TG 425 ile karıştırılmamalıdır, bireysel hayvanların dozda olduğu.

Yöntem Nasıl Çalışıyor?

Üç hayvan seçilmiş başlangıç dozunu uygulanır.

Sonraki karar şunları içerebilir:

• Aynı dozda ek bir grup test edin;
• Daha yüksek bir dozda test;
• Daha düşük bir dozda test; veya
• Çalışmayı durdur ve uygun sınıflandırmayı tayin edin.

Karar, OECD kılavuzunda belirtilen karar kurallarına göre belirlenir.

TG 423 Nedir?

TG 423 öncelikle bir sınıflandırma tabanlı yöntem.

Bir maddenin akut toksisite kategorisine atanmasına izin verir ve bir akut toksisite kategorisinin belirlenmesine izin verir ve bir maddenin akut toksisite kategorisine tayin edilmesine izin verir. LD50 kesme değeri veya aralığıTam bir sayısal LD50 belirlemek yerine.

TG 423 Ne zaman Uygun Olabilir?

TG 423 özellikle temel düzenleyici amacın nerede olduğuna faydalı olabilir:

• Tehlike sınıflandırması;
• akut bir toksisite kategorisinin ataması; veya
• Bir LD50 kesme aralığının tanımlanması.

OECD TG 425: Up-and-Down Prosedürü

Prensip Prensibi

OECD TG 425 temel olarak farklı bir deneysel tasarım kullanır.

The The The The The The The The Up-and-Down Prosedür (UDP) Test öğesini test öğeyi yönetmek Bir zamanlar bir hayvan.

Önceki hayvanın cevabı bir sonraki hayvana verilen dozu belirler.

Basitleştirilmiş şartlarda:

• Bir hayvan hayatta kalırsa, bir sonraki hayvan genellikle daha yüksek bir doz alır;
• Bir hayvan ölürse, bir sonraki hayvan genellikle daha düşük bir doz alır.

Ana test, rehberde belirtilen istatistiksel durdurma kriterlerinden birine kadar önceden tanımlanmış temel kurallara göre devam etmektedir.

Hayvanlar normalde bir sonraki hayvan tedavi edilmeden önce önceki hayvanın sonucuna izin verilir. OECD yaklaşık bir aralığı açıklar 48 saat her zamanki gibiAncak uygun aralığın başlangıç, toksik işaretlerin süresi ve ağırlığına bağlıdır.

TG 425 Farklı Nedir?

TG 420 ve TG 423'ün aksine, TG 425 özellikle üretebiliyor:

• Birbiri tahmini LD50Ve
• Bir ilişkili Güven aralığı.

LD50, Up-and-Down Prosedürü için belirtilen istatistiksel metodoloji kullanılarak hesaplanır.

OECD ayrıca TG 425 ile ilişkili istatistiksel yazılım sağlar; laboratuvarlar geçerli metodolojiyi kullanmalıdır ve istatistiksel prosedürün varsayımlarını ve sınırlarını anlamalıdır.

Limit Test

TG 425 ayrıca bir tane içerir Limit-test yaklaşımı Bu, mevcut bilgilerin test maddesinin nispeten düşük akut toksisiteye sahip olması muhtemel olduğu konusunda uygun olabilir.

Limit testi kullanma kararı, mevcut bilgilere dayanarak bilimsel olarak haklılanmalıdır.

TG 425 Ne Zaman Uygun Olabilir?

TG 425, bir düzenleyici program gerektiğinde özellikle yararlı olabilir LD50'nin sayısal tahmini Sadece bir toksisite sınıfına atamak yerine.

TG 420 vs TG 423 vs TG 425: Anahtar Farklılıklar

Tek bir yöntem otomatik olarak başkalarına üstün görülmemelidir. Uygun yönteme bağlıdır Tasarlanması gereken düzenleyici soru.

Animal Selection

OECD akut oral toksisite yönergeleri genellikle genel olarak tanımlar sıçan Tercih edilen türler olarak, kadınlar normalde kullanılır.

Kadınların kullanımı, rehbersel gelişim sırasında dikkate alınan kanıtlara dayanıyor, seks farklılıkları gerçekleştiği yerde, kadınlar genellikle biraz daha hassastır.

Erkek bunun yerine nerede kullanılır, bilimsel rasyonel belgelenmelidir.

Hayvanlar sağlıklı, uygun bir şekilde acclimatize edilmeli ve uygulanabilir kılavuzda açıklanan yaş ve vücut ağırlığı özellikleri içinde olmalıdır.

Testin Yönetimi

Test öğesi normalde ya da tam olarak bir şekilde yapılır gavage tarafından tek dozBir mide tüpü veya uygun intubation cannula kullanarak.

Hayvanlar genellikle uygulanabilir kılavuz çizgisine uygun olarak yapılmadan önce hızlıdır.

Bir araç gerekli olduğunda, seçimi dikkate alınmalıdır:

• Test materyalinin çözünürlük veya disperbilitesi;
• istikrar;
• homogeneity;
• Test öğesi ile uyumluluk;
• Aracın potansiyel biyolojik etkileri;
• Achievable konsantrasyon ve hacmi yapabilir.

Hesaplama stratejisi bilimsel olarak haklı ve belgelenmiş olmalıdır.

Klinik Gözlemler

Dikkatli klinik gözlem akut toksisite çalışmalarında gereklidir.

Hayvanlar da yönetimden sonra bireysel olarak gözlemlenmelidir:

• İlk 30 dakika boyunca en az bir kez;
• İlk 24 saat boyunca periyodik olarak;
• İlk dört saat boyunca özellikle dikkat; ve
• Her gün gözlem dönemi boyunca.

Gözlem dönemi genellikle 14 günBununla birlikte, süresi bilimsel olarak toksik etkilerin başlangıç ve yeniden değerlendirilmesine dayanan nerede uygulanabilir olabilir.

Klinik gözlemler, uygulanabilir olan ilgili işaretleri sistematik olarak belgelemelidir:

• Cilt ve kürk;
• Gözler ve mucous membranlar;
• solunum sistemi;
• dolaşım sistemi;
• Otonom sinir sistemi;
• merkezi sinir sistemi;
• Somatomotor aktivitesi;
• Davranışsal desen.

Dikkat ayrıca tremors, konvulsiyonlar, tükürme, ishala, letharji, uyku, coma ve diğer ilgili bulgulara da verilir.

Şiddetli ve kalıcı ağrı veya sıkıntı gösteren hayvanlar veya toplantı kurulmuş insan-endpoint kriteri, uygulanabilir hayvan-welfare prosedürlerine uygun olarak insanlaştırmalıdır.

Vücut Ağırlık

Bireysel hayvan vücut ağırlığı geçerli OECD kılavuzuna göre kaydedilmelidir.

Vücut ağırlığı değişiklikleri sistemik toksisitenin yararlı destekleyici kanıtlarını sağlayabilir ve birlikte düşünülmelidir:

• Klinik gözlemler;
• hayatta kalmak;
• toksisitenin başlangıç zamanı;
• Bulguların iyileşmesi veya kalıcılığı;
• brüt patolojik gözlemler.

Necropsy ve Gross Pathology

Çalışmada kullanılan tüm hayvanlar buna tabi olmalıdır brüt nekropsyAyrıca:

• Planlanan sona erdirmek için hayatta kalan hayvanlar;
• Hayvanlar ölü bulundu; ve
• Hayvanlar insan nedenleri için euthanized.

Gross patolojik anormallikler belgelenmelidir.

Geçerli kılavuzluk ve bulguların doğası ile, brüt anormalliği gösteren dokuların mikroskobik incelenmesi de düşünülebilir.

Akut Oral Zehir ve GHS Sınıfları

Akut oral toksisite bilgileri, UN Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemical'a göre sınıflandırmaya katkıda bulunabilir.

Mevcut UN GHS oral akut toksisite kategorileri mg/kg vücut ağırlığında ifade edilen akut toksisite tahminlerine dayanmaktadır.

Kategori 5, dahil edilmesi gereken belirli kriterlerin karşılandığı karşılaştırmalı olarak düşük akut toksisite maddelerine yönelik başka bir kategoridir.

GHS'nin düzenleyici uygulanması yetkiler arasında farklılık göstermektedir. Bu nedenle, sınıflandırma her zaman yasal olarak geçerli ulusal veya bölgesel çerçeveye karşı doğrulanmalıdır, çünkü UN GHS metninin kendisi geçerli mevzuat oluşturur.

Akut Oral Toxicity Testinde 3Rs

TG 420, TG 423 ve TG 425, geleneksel akut lethality testinden önemli bir evrim temsil ediyor.

The The The The The The The The 3Rs :

Değiştirme

Bilimsel olarak geçerli ve düzenleyici olarak kabul edilebilir alternatifler yerine hayvan dışı yaklaşımlar kullanın gerekli bilgileri sağlayabilir.

Azaltımı Azaltım

Bilimsel ve düzenleyici derecede anlamlı bilgiler elde etmek için gerekli minimum sayıda hayvan kullanın.

Modern akut oral toksisite yöntemlerinde kullanılan eşdeğer ve sınıflandırma odaklı tasarımlar önemli örneklerdir. Azaltımı Azaltım Prensip.

Refinement

Tasarım ve uygulanabilir acı, acı ve sıkıntıyı en aza indirmek için çalışmalar yürütmek.

Örnekler içerir:

• Uygun başlangıç seçimi;
• dozların kaçınması, mümkün olan gereksiz ciddi toksisiteye neden olması bekleniyor;
• Sık sık klinik gözlem;
• Bilinen insan uç noktaları;
• Gerekli olan zamanında veteriner müdahale ve insan euthanasia.

Hayvan sayılarını "Replacement" olarak tanımlamak önemlidir. Dayanıklılık ve değiştirme, 3Rs çerçevesi içinde farklı kavramlardır.

Bir Hayvan Çalışmasına Başlamadan Önce Mevcut Bilgilerin Önemi

Akut bir oral toksisite çalışması basitçe başlamamalıdır çünkü bir rehber var.

Bir in vivo çalışma başlatmadan önce, tüm makul olarak mevcut bilgiler incelenmelidir.

Bu içerebilir:

• fizykokimyasal özellikler;
• Mevcut toksisite verileri;
• Yapı-aktivite bilgileri;
• İlgili maddelerden veri;
• available in vitro information;
• Önceki hayvan verileri;
• İnsan maruz kalma bilgileri, nerede ilgili;
• Düzenleyici sınıflandırma zaten mevcut;
• Korrosivite veya şiddetli tahriş ile ilgili bilgiler.

Bu inceleme iki önemli amaçlara hizmet eder:

1. Ek hayvan testlerinin bilimsel ve yasal olarak gerekli olup olmadığını belirleme; ve
2. En uygun OECD yöntemini seçin ve testin gerekli olduğu doza başlayın.

Korrosive veya güçlü rahatsız edici özellikler nedeniyle şiddetli bir ağrı veya sıkıntı üretmek sadece bu tür testlerin bilimsel olarak gereksiz olduğu akut toksisite verileri üretmek için uygulanmalıdır.

GLP altında Akut Oral Zehirlenme Çalışmaları

Akut bir oral toksisite çalışması düzenleyici teslim ve GLP için amaçlandığında, çalışma gerekli olmalıdır. OECD Good Laboratory Practice Ve ilgili OECD Test Kılavuzu.

GLP, non-klinik güvenlik çalışmalarının nasıl olduğunu ele alan kaliteli bir sistem sunar:

• Planlanan;
• yapıldı;
• izlendi;
• kaydedildi;
• De ki:
• arşivlendi.

Önemli elementler şunları içerir:

• Onaylanmış bir çalışma planı;
• Açıkça tanımlanmış Çalışma Yöneticisi sorumluluğu;
• kalifiye ve eğitimli personel;
• Geometrik test ve referans öğeleri;
• kontrollü ekipman ve bilgisayarlı sistemler;
• contemporaneous ham-data kaydı;
• Bağımsız Kalite Güvence faaliyetleri;
• Belgelenen sapmalar;
• kontrollü son raporlama;
• Kayıtların ve örneklerin tutulması ve arşivlenmesi.

OECD'de hangi çalışmalar yapılır? Verilerin Karşılıklı Kabulü (MAD) framework, applicability ayrıca GLP uyumluluk-monitoring durumuna ve test tesisinin kapsamına ve katılımcı ülkeye bağlıdır.

Appropriate OECD Kılavuzuline seçin

TG 420, TG 423 ve TG 425 arasındaki seçim, düzenleyici amaç ve mevcut bilimsel bilgilere dayanarak çalışmaya başlamadan önce yapılmalıdır.

Pratik bir kavramsal yaklaşım:

TG 420'yi düşünün:

Düzenleyici hedef, kesin bir sayısal LD50 gerektiren belirgin toksisite ve tehlike sınıflandırmasını taklit ederek tatmin edilebilir.

TG 423'ü düşünün:

akut bir toksisite sınıfına sınıflandırmak veya bir LD50 kesme aralığının kurulması temel gerekliliktir.

TG 425'i düşünün:

Bir sayısal LD50 tahmin ve ilişkili güven aralığı özellikle gereklidir.

Bunlar evrensel seçim kuralları yerine genel düşüncelerdir.

Nihai yöntem, geçerli düzenleyici veri gereksinimini göz önünde bulundurarak seçilmelidir, OECD Rehberlik Belgesi No. 24, test materyali ve hayvan-welfare dikkatleri hakkında mevcut bilgiler.

Sonuç Sonuç Sonuç Sonuç

OECD TG 420, TG 423 ve TG 425 akut oral toksisiteyi değerlendirmek için farklı bilimsel olarak doğrulanmış stratejiler sunmaktadır.

Büyük ayrım sadece kullanılan hayvanların sayısı değildir:

• TG 420 Bir şeydir Sabit Dose Prosedürü Açık toksisiteyi taklit etmek.
• TG 423 Bir şeydir Akut Toksik Sınıf Yöntemi Sınıflandırmayı desteklemek için üç hayvan eşdeğer bir adım kullanıyor.
• TG 425 Bir şeydir Up-and-Down Prosedür Bir LD50'yi ve güven aralıkını tahmin etmek için bireysel tutarlı bir şekilde yapılır.

Yöntemin doğru seçimi ve uygulanması, düzenleyici amaç, mevcut toksikolojik bilgiler, hayvan refahı, doz-seleksiyon stratejisi ve uygulanabilir GLP gereklilikleri dikkate almalıdır.

Modern akut toksisite değerlendirmesi, bir lethal dozun rutin kararlılığı olarak görülmemelidir, ancak bir olasılık olarak görülmelidir. regulatory decision-making process designed to generate the necessary hazard information using a scientifically justified and ethically responsible study design.

Referanslar Referanslar

1. OECD (2002). Test No. 420: Acute Oral Toxicity – Fixed Dose Procedure. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4. OECD Publishing, Paris. DOI: 10.1787/9789264070943-en.
2. OECD (2002). Test No. 423: Acute Oral Toxicity – Acute Toxic Class Method. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4. OECD Publishing, Paris. DOI: 10.1787/9789264071001-en.
3. OECD (2022). Test No. 425: Acute Oral Toxicity: Up-and-Down Procedure. OECD Guidelines for the Testing of Chemicals, Section 4. OECD Publishing, Paris. DOI: 10.1787/9789264071049-en.
4. OECD (2002). Guidance Document on Acute Oral Toxicity Testing. OECD Series on Testing and Assessment No. 24. OECD Publishing, Paris. DOI: 10.1787/9789264078413-en.
5. United Nations (2025). Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals (GHS), Eleventh Revised Edition. ST/SG/AC.10/30/Rev.11.
6. OECD (1998). OECD Principles on Good Laboratory Practice. OECD Series on Principles of Good Laboratory Practice and Compliance Monitoring No. 1. DOI: 10.1787/9789264078536-en.