Тест на раздражение глаз: научный и этический подход к оценке безопасности глаз

Глаз является одним из самых чувствительных и уязвимых органов организма при воздействии химических веществ. Окулярные ткани, такие как роговица, радужка и конъюнктива, могут понести необратимые повреждения при химическом контакте, что приводит к серьезным последствиям, которые могут даже привести к постоянной потере зрения. Таким образом, определение острых раздражающих и коррозионных эффектов, которые химические вещества, пестициды, чистящие средства, косметические ингредиенты и промышленные составы могут оказывать на глаза, является незаменимым требованием как для безопасности пользователей, так и для классификации СГС. Тест на раздражение глаз формирует научную основу для такой оценки. Наша лаборатория проводит испытания на раздражение глаз и коррозию в соответствии с последними руководящими принципами ОЭСР, принципами GLP и с полным соблюдением подхода 3R.

Научная основа и значение раздражения глаз

Раздражение глаз — это местная, обычно обратимая воспалительная реакция, возникающая в результате контакта вещества с глазом. Клинически он проявляется как конъюнктивальное покраснение (эритема), конъюнктивальный отек (хемоз), непрозрачность роговицы, повреждение радужной оболочки, разрывы, боль и жжение. Коррозия глаз, с другой стороны, является более тяжелым состоянием, при котором вещество вызывает необратимое повреждение глазных тканей; оно характеризуется изъязвлением роговицы, некрозом, перфорацией и постоянной потерей зрения.
Различие между этими двумя условиями имеет решающее значение, поскольку вещество с коррозионным потенциалом представляет неприемлемый риск для безопасности пользователей и классифицируется в категории наибольшей опасности в соответствии с критериями СГС.

Риск раздражения глаз не ограничивается промышленными химикатами. Чистящие средства, средства личной гигиены, косметика, сельскохозяйственные пестициды и даже некоторые пищевые добавки, используемые в повседневной жизни, могут вступать в контакт с глазами. Дети, в частности, подвергаются более высокому риску от таких веществ из-за их привычки потирать глаза.

Данные раздражения глаз непосредственно используются для определения утверждений об опасности и пиктограмм, используемых в маркировке продукции, для подготовки паспортов безопасности (SDS), для установления протоколов реагирования на чрезвычайные ситуации и для определения рекомендаций для средств индивидуальной защиты.
Кроме того, эти данные являются фундаментальным требованием для оценки химической безопасности регулирующих органов и процессов авторизации продукции.

OECD TG 405: классический тест на раздражение глаз

ОЭСР TG 405 является международно признанным стандартом in vivo протокол испытаний для оценки потенциала острого раздражения и коррозии, которые химические вещества и смеси могут вызывать в тканях глаза; Основной принцип теста включает применение определенного количества тестируемого вещества (обычно 0,1 мл жидкости или 100 мг твердого вещества) к конъюнктивальному мешку глаза испытуемого в одном приложении и оценку глазных реакций в определенные моменты времени. Оценка основана на четырех основных параметрах: непрозрачность роговицы, повреждение радужной оболочки, конъюнктивальное покраснение и конъюнктивальный отек. Каждый параметр оценивается по шкале от 0 (ни один) до 4 (тяжелый), и зависящий от времени ход этих оценок имеет решающее значение для определения того, является ли воздействие вещества на глаз обратимым.

Наиболее важной особенностью TG 405 является пошаговая стратегия тестирования, необходимая до начала тестирования. Эта стратегия была разработана для предотвращения ненужного использования животных и защиты благосостояния животных в высшей степени. На первом этапе оцениваются существующие данные о человеке и животных, анализ соотношения структуры и активности и физико-химические свойства. В частности, вещества со значением рН ≤2 или ≥11,5 непосредственно классифицируются как «коррозионные по глазу» (категория 1) из-за их сильных кислотно-основных характеристик и не in vivo Проводится тестирование. На втором этапе потенциал коррозии и серьезных повреждений предварительно проверяется с помощью валидированного анализа. in vitro и ex vivo испытания (OECD TG 437, 438, 491, 492). Однако, когда этих шагов недостаточно, чтобы окончательно классифицировать потенциал вещества для раздражения глаз. in vivo Тест ОЭСР TG 405 проводится в крайнем случае.

В нашей лаборатории in vivo Тестирование TG 405 неизбежно, мы начинаем тест с одного субъекта и, исходя из результатов, включаем дополнительных субъектов только при необходимости. Этот последовательный дизайн теста обеспечивает научную обоснованность, сводя количество животных к минимуму. Кроме того, опытные ветеринары постоянно следят за животными на протяжении всего теста; в случае тяжелой реакции тест немедленно прекращается, и назначается соответствующее обезболивающее лечение.

Современные альтернативы: методы in vitro и ex vivo

Сегодня существует множество in vitro и ex vivo методы—Разработана в качестве альтернативы тестированию на животных и одобрена ОЭСР—Для оценки раздражения глаз. Эти методы становятся все более предпочтительными не только из-за их соответствия принципам 3R, но и потому, что они обеспечивают более быстрые, экономичные и воспроизводимые результаты.

OECD TG 437 (BCOP – Bovine Corneal Opacity and Permeability Test) является ex vivo Тест, который использует роговицы бычьих глаз, полученные с бойни. После того, как тестируемое вещество наносят на роговицу, измеряют непрозрачность роговицы (облачность) и проницаемость. The in vitro Оценка раздражения, полученная путем объединения этих двух параметров, используется для оценки потенциала вещества для раздражения глаз. BCOP обеспечивает высокую точность, особенно при идентификации тяжелых раздражителей и агрессивных веществ.

OECD TG 438 (ICE – Isolated Chicken Eye Test) является ex vivo Тест с использованием куриных глаз. Тестируемое вещество наносится на изолированный куриный глаз, и оцениваются изменения роговицы, радужной оболочки и конъюнктивы. Тест ICE особенно эффективен при оценке раздражающего потенциала веществ, таких как поверхностно-активные вещества и спирты.

OECD TG 491 (STE - краткосрочный тест на воздействие витро) является in vitro Тест проводился с использованием линии эпителиальных клеток роговицы человека. Тестируемое вещество наносится на клетки в течение короткого периода времени, и жизнеспособность клеток измеряется с помощью анализа MTT. STE используется специально для оценки раздражающего потенциала водорастворимых веществ.

OECD TG 492 (RhCE – Восстановленный эпителиальный тест, похожий на эпителий человека) является in vitro Тест, который использует трехмерные модели тканей, имитирующие эпителий роговицы человека. Тестируемое вещество наносится на модель ткани, и измеряется жизнеспособность клеток. RhCE является предпочтительным методом, особенно для косметики и средств личной гигиены, поскольку тестирование на животных запрещено в соответствии с Регламентом ЕС по косметике.

В приведенной ниже таблице приведены основные руководящие принципы ОЭСР, используемые при оценке раздражения глаз и их характеристик.

Классификация СГС и категории раздражения глаз

Результаты теста на раздражение глаз подразделяются на три основные категории в соответствии с критериями Глобальной Гармонизированной Системы (GHS). Категория 1 (серьезное повреждение глаз / коррозия глаз) характеризуется необратимым повреждением глазной ткани или постоянным нарушением роговицы, радужной оболочки или конъюнктивы, по крайней мере, у одного испытуемого в течение 21 дня. Эта категория обозначена надписью «Вызывает серьезное повреждение глаз» и отмечена коррозионной пиктограммой (GHS05). Категория 2А (Раздражитель глаз) характеризуется положительными глазными реакциями, которые полностью обратимы в течение 21 дня, по крайней мере, у двух испытуемых; она помечена утверждением «Вызывает серьезное раздражение глаз» и отмечена пиктограммой восклицательного знака (GHS07). Категория 2B (Mild Eye Irritant), с другой стороны, охватывает легкие и временные эффекты, которые не полностью соответствуют критериям категории 2A, но полностью разрешаются в течение 7 дней; эта категория не используется в некоторых правилах.

Эта классификация непосредственно используется для определения многочисленных нормативных требований, начиная от маркировки продукта до транспортировки, хранения и инструкций по использованию.
Неправильная или неполная классификация может привести как к юридическим санкциям, так и к рискам для безопасности пользователей. Поэтому правильный дизайн и тщательное выполнение теста на раздражение глаз являются критическими факторами, которые напрямую влияют на надежность вашего продукта и соответствие нормативным требованиям на рынке.

Проведение тестов на раздражение глаз в нашей лаборатории

В нашей сертифицированной GLP лаборатории мы проводим испытания на раздражение глаз и коррозию в полном соответствии с международными стандартами. Наша стратегия тестирования следует поэтапному подходу, рекомендованному ОЭСР: сначала оценка существующих данных и физико-химических свойств; затем применение проверенных данных. in vitro/ex vivo испытания; и, в качестве последнего средства, выполнение in vivo Тестирование. Эта стратегия обеспечивает высокий уровень научной обоснованности и этической ответственности.

Для in vitro и ex vivo Наша лаборатория предлагает методы BCOP (TG 437), ICE (TG 438), STE (TG 491) и RhCE (TG 492) в целом. Эти тесты значительно уменьшают использование животных, обеспечивая более прямую экстраполяцию на человеческий глаз. Особенно для косметики и средств личной гигиены, поскольку тестирование на животных запрещено в соответствии с Регламентом ЕС по косметике. in vitro Методы являются единственным обязательным вариантом.

В случаях, когда in vivo Тестирование неизбежно, мы работаем в полном соответствии с принципами 3R. Мы начинаем тест с одного предмета и включаем дополнительные предметы только тогда, когда это необходимо. Опытные ветеринары постоянно контролируют испытуемых на протяжении всего теста; в случае тяжелой реакции тест немедленно прекращается, и назначается соответствующее обезболивающее лечение. Все наблюдения регистрируются в соответствии со стандартными операционными процедурами, соответствующими GLP.

Одним из ключевых преимуществ нашей лаборатории является то, что результаты тестов могут быть непосредственно интегрированы в ваши нормативные документы. Всеобъемлющие отчеты об исследованиях, соответствующие шаблону ОЭСР, соответствуют требованиям Регламента ЕС REACH и CLP, FIFRA и TSCA EPA США и KKDIK Турции. Кроме того, мы предоставляем все необходимые данные в полном объеме для подготовки паспорта безопасности вашего продукта (SDS).

Часто Задаваемые Вопросы

Одним из наиболее распространенных вопросов, которые мы получаем в отношении теста на раздражение глаз, является то, какое руководство ОЭСР подходит для какого продукта. Выбор зависит от физической формы продукта, растворимости и вашей нормативной цели. Для водорастворимых веществ может быть целесообразным TG 491 (STE); для водорастворимых веществ - TG 437 (BCOP) или TG 492 (RhCE); и для поверхностно-активных веществ - TG 438 (ICE). Когда in vivo Для окончательной классификации требуется тестирование, используется TG 405. Наша лаборатория оценивает характеристики вашего продукта, чтобы рекомендовать наиболее подходящий метод.

Другой распространенный вопрос заключается в том, требуется ли тестирование TG 405 для вещества с экстремальным значением рН.
Нет. Вещества с рН ≤2 или ≥11,5 непосредственно классифицируются как «серьезные повреждения глаз / коррозионные» (категория 1) без применения OECD TG 405. Этот подход был одобрен ОЭСР для предотвращения ненужного использования животных.

Также часто задают вопрос, является ли in vitro Результаты испытаний могут служить заменой для ТГ 405 ОЭСР. Во многих случаях они могут. В частности, подтвержденный in vitro Тесты, такие как BCOP и RhCE, могут быть достаточными для классификации вещества как «категория 1» (коррозионное / серьезное повреждение глаз) или «некатегория 2» (не раздражающее). Однако для разграничения по категории 2A/2B in vivo Тест может потребоваться в некоторых случаях. Что касается продолжительности испытания, то in vivo Тест TG 405 занимает примерно 3-4 недели, включая период наблюдения, который может длиться до 21 дня. in vitro Альтернативные тесты обычно дают результаты в течение 1-2 недель. Включая отчетность и проверки качества, общая продолжительность составляет 4-6 недель.

Глаза являются наиболее уязвимыми органами для химической опасности, и научное подтверждение этой чувствительности должно быть приоритетом для каждого ответственного производителя. Используя OECD TG 405 и дополнительные альтернативные тесты in vitro, наша лаборатория устанавливает профиль безопасности глаз вашей продукции в соответствии с самыми высокими научными стандартами и в полном соответствии с принципами 3R. Для оценки раздражения глаз и коррозии обратитесь в нашу сертифицированную GLP лабораторию и давайте вместе спланируем вашу индивидуальную стратегию тестирования.