Eye Irritation Test: A Scientific and Ethical Approach to Ocular Safety Assessment

وتعتبر العين واحدة من أكثر أجهزة الجسم حساسية وضعفا عندما تتعرض للمواد الكيميائية. ويمكن أن تتعرض الأنسجة العضلية، مثل القرنية، والآيريس، والكونجونسيفا، لأضرار لا رجعة فيها على الاتصال الكيميائي، مما يؤدي إلى عواقب خطيرة قد تؤدي حتى إلى فقدان رؤية دائمة. ولذلك، فإن تحديد الآثار الحادّة المتأصلة والتآكلية التي يمكن أن تنجم عن المواد الكيميائية، ومبيدات الآفات، ومنتجات التنظيف، والمكوّنات التجميلية، والتركيبات الصناعية، على العين، شرط لا غنى عنه بالنسبة لسلامة المستخدمين وتصنيف النظام المنسق عالمياً. اختبار تهيج العين ويشكل الأساس العلمي لهذا التقييم. ويخضع مختبرنا لاختبارات تهيج العين والارتباط وفقاً لآخر المبادئ التوجيهية لمنظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي، في إطار مبادئ GLP، ومع التقيد التام بنهج الـ 3R.

The Scientific Basis and Importance of Eye Irritation

إن تهيج العين هو استجابة محلية، وعادة ما تكون قابلة للعكس ناجمة عن اتصال المادة بالعين. Clinically, it manifests as conjunctival redness (erythema), conjunctival edema (chemosis), corneal opacity, iris damage, tearing, pain, and a burning sensation. ومن ناحية أخرى، فإن تآكل العين هو حالة أشد حدة تسبب فيها المادة ضرراً لا رجعة فيه للأنسجة المنوية؛ ويتصف به الالتهاب القشري، والتكسير، والخوف، وفقدان الرؤية الدائمة.
ويكتسي التمييز بين هذين الشرطين أهمية حاسمة؛ لأن المادة التي تنطوي على إمكانية التآكل تشكل خطراً غير مقبول على سلامة المستخدمين وتصنف في أعلى فئة من فئات المخاطر وفقاً لمعايير النظام المنسق عالمياً.

The risk of eye irritation is not limited to industrial chemicals. ويمكن لمنتجات التنظيف، ومنتجات الرعاية الشخصية، والمستحضرات التجميلية، ومبيدات الآفات الزراعية، وحتى بعض المواد الغذائية المضافة المستخدمة في الحياة اليومية أن تتصل بالعين. ويتعرض الأطفال، على وجه الخصوص، لخطر أكبر من هذه المواد بسبب عادة فرك عيونهم.

وتستخدم بيانات تهيج العين مباشرة لتحديد بيانات المخاطر والرسوم البيانية المستخدمة في تسمية المنتجات، وإعداد صحائف بيانات السلامة، ووضع بروتوكولات للاستجابة في حالات الطوارئ، وتحديد التوصيات المتعلقة بمعدات الحماية الشخصية.
وعلاوة على ذلك، تشكل هذه البيانات شرطا أساسيا لتقييمات السلامة الكيميائية التي تقوم بها السلطات التنظيمية وعمليات الترخيص بالمنتجات.

OECD TG 405: Classical In Vivo Eye Irritation Test

OECD TG 405 معيار معترف به دوليا in vivo بروتوكول اختبار لتقييم احتمال حدوث تهيج حاد وتآكل حاد قد تسببه المواد والخلائط الكيميائية للأنسجة العينية. ويشتمل المبدأ الأساسي للاختبار على تطبيق كمية محددة من مادة الاختبار (نحو 0.1 ملليتر من السائل أو 100 ملغم من الصلب) على الركيزة التقاطعية من عين موضوع الاختبار في تطبيق واحد وتدرج ردود الفعل المنوية في نقاط زمنية محددة. ويستند التقييم إلى أربعة بارامترات رئيسية هي: عدم الاكتراث القرني، والأضرار الناجمة عن الأزمات، وإعادة التكافل، والنزعة التماثلية. ويسجل كل بارامتر على مقياس من صفر (واحد) إلى 4 (الفصل)، ويكتسي المسار المعتمد على الزمن لهذه الدرجات أهمية حاسمة في تحديد ما إذا كان أثر المادة على العين قابلا للنقض.

The most important feature of TG 405 is the stepwise testing strategy required prior to initiate the test. وقد وضعت هذه الاستراتيجية لمنع الاستخدام غير الضروري للحيوانات ولحماية رفاه الحيوانات إلى أعلى درجة. وفي المرحلة الأولى، يجري تقييم البيانات البشرية والحيوانية القائمة، وتحليلات العلاقة بين الهيكل والنشاط، والخواص الفيزيائية الكيميائية. وعلى وجه الخصوص، تصنف المواد ذات القيمة الهيدروجينيـة للربـع 2 أو 11.5 مباشرة على أنها " ممر العين " (الفئة 1) نظرا لخصائص حمضها/قاعدةها القوية، ولا توجد in vivo ويجري الاختبار. وفي المرحلة الثانية، يتم فحص إمكانية التآكل والأضرار الخطيرة مقدما باستخدام مثبتة in vitro و ex vivo اختبارات (منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي) غير أنه عندما تكون هذه الخطوات غير كافية للتصنيف النهائي لقدرة المادة على تهيج العين، in vivo وتجري منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي اختبار 405 كملاذ أخير.

في مختبرنا in vivo ولا يمكن تجنب الاختبار الذي يجريه الفريق 405، ونحن نبدأ الاختبار مع موضوع واحد، وعلى أساس النتائج، لا تشمل مواضيع إضافية إلا عند الضرورة. وهذا التصميم التسلسلي للاختبار يكفل الصحة العلمية مع إبقاء عدد الحيوانات إلى أدنى حد. وبالإضافة إلى ذلك، يقوم الأطباء البيطريون ذوو الخبرة باستمرار برصد الحيوانات طوال فترة الاختبار؛ وفي حالة حدوث رد فعل شديد، يُنهى الاختبار على الفور، ويُجرى العلاج المسنن المناسب.

Modern Alternatives: In Vitro and Ex Vivo Methods

اليوم، هناك العديد in vitro و ex vivo الأساليب—استحدثت كبدائل لاختبار الحيوانات وصادقت عليها منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي—لتقييم تهيج العين وتُفضَّل هذه الأساليب على نحو متزايد ليس فقط على امتثالها لمبادئ الـ 3R وإنما أيضاً لأنها توفر نتائج أسرع وأكثر اقتصاداً وأكثر قابلية للتكرار.

OECD TG 437 (BCOP - Bovine Corneal Opacity and Permeability Test) هو ex vivo الإختبار الذي يَستعملُ قرانَ العيونِ البفينةِ المَحْصُول عليها مِنْ المسلخِ. وبعد تطبيق المادة الاختبارية على القرنية، تقاس الظلم المرجاني (السمعية) والقدرة على الاستمرار. The in vitro وتستخدم درجات التهيج، المستمدة من الجمع بين هذين البارامترات، لتقييم قدرة المادة على تهيج العين. The BCOP provides high accuracy, particularly in the identification of severe irritants and corrosive substances.

OECD TG 438 (ICE - Isolated Chicken Eye Test) هو ex vivo اختبار يستخدم عيون الدجاج وتُطبق مادة الاختبار على عين الدجاج المعزولة، وتُقيَّم التغييرات التي تطرأ على القرينة، أيريس، والتقاطع. The ICE test is particularly effective in assessing the irritation potential of substances such as surfactants and alcohols.

OECD TG 491 (STE - Short-Term in Vitro Exposure Test) هو in vitro أُجري اختبار باستخدام خط الخلايا الملحمية البشرية وتُطبَّق مادة الاختبار على الخلايا لفترة قصيرة، وتُقيَّم صلاحية الخلايا باستخدام مقولة MTT. ويُستخدم نظام STE على وجه التحديد لتقييم إمكانات تهيئة المواد التي تعسر المياه.

OECD TG 492 (RhCE — Reconstituted Human Corneal-Like Epithelial Test) هو in vitro الاختبار الذي يستخدم عارضات الأنسجة ثلاثية الأبعاد يُقلّد ملحمية الإنسان وتطبق مادة الاختبار على نموذج الأنسجة، وتقاس صلاحية الخلايا. والشبكة هي طريقة مفضلة، لا سيما فيما يتعلق بالمستحضرات التجميلية ومنتجات الرعاية الشخصية، لأن اختبار الحيوانات محظور بموجب لائحة الاتحاد الأوروبي المتعلقة بالمستحضرات التجميلية.

ويوجز الجدول أدناه المبادئ التوجيهية الرئيسية لمنظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي المستخدمة في تقييم تهيج العين وخصائصها.

فئة الخدمات العامة

وتصنف نتائج اختبار تهيج العين في ثلاث فئات رئيسية وفقا لمعايير النظام المتوائم على الصعيد العالمي. وتتميز الفئة 1 (ضرر العين المرهق/الممر البصري) بضرر لا رجعة فيه من أنسجة الأوعية أو إضعاف دائم للكورنيا أو أيريس أو كونجونسيفا في موضوع اختبار واحد على الأقل في غضون 21 يوما. هذه الفئة ملصقة بالبيان "يسبب ضرراً خطيراً في العين" وعلامة بالتصوير التآكلي وتتميز الفئة 2 ألف (أي أي مبعثرة) برد فعل أوعية إيجابية قابلة للعكس تماماً في غضون 21 يوماً على الأقل في موضوعي اختبار على الأقل؛ وهي تحمل علامة " تسبب تهيجاً خطيراً في العين " وتميز بعلامة الاستخلاص (GHS07). أما الفئة 2 باء (المرح المتوسط) فتغطي، من ناحية أخرى، آثاراً بسيطة ومرنة لا تفي تماماً بمعايير الفئة 2 ألف، ولكنها تحل تماماً في غضون 7 أيام؛ ولا تستخدم هذه الفئة في بعض الأنظمة.

ويُستخدم هذا التصنيف مباشرة لتحديد العديد من المتطلبات التنظيمية التي تتراوح من وضع علامات على المنتجات إلى النقل والتخزين وتعليمات الاستخدام.
ويمكن للتصنيف غير الصحيح أو غير المكتمل أن يؤدي إلى فرض عقوبات ومخاطر قانونية على سلامة المستخدمين. ومن ثم، فإن التصميم السليم والتطبيق الدقيق لاختبار تهيج العينين عاملان حاسمان يؤثران تأثيرا مباشرا على موثوقية المنتج والامتثال التنظيمي في السوق.

إجراء اختبارات لري العين في مختبرنا

وفي مختبرنا المصادق عليه، نجري اختبارات تهيج العين والارتباط مع الامتثال الكامل للمعايير الدولية. وتأتي استراتيجية اختبارنا وفق نهج الخطوة الذي أوصت به منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي: أولا، تقييم البيانات الموجودة والممتلكات الفيزيائية الفيزيائية الفيزيائية؛ ثم تطبيق نظام مصادق عليه in vitro/ex vivo الاختبارات؛ وكحل أخير، in vivo اختبار. وتكفل هذه الاستراتيجية أعلى مستويات الصحة العلمية والمسؤولية الأخلاقية.

للفيترو و ex vivo والاختبارات، يقدم مختبرنا أساليب BCOP (TG 437)، و ICE (TG 438)، و STE (TG 491)، و RhCE (TG 492) بكاملها. وهذه الاختبارات تقلل إلى حد كبير من استخدام الحيوانات وتسمح في الوقت نفسه باستقراء أكثر مباشرة للعين البشرية. ولا سيما بالنسبة للمستحضرات التجميلية ومنتجات الرعاية الشخصية، نظراً إلى أن اختبار الحيوانات محظور بموجب لائحة الاتحاد الأوروبي المتعلقة بالمستحضرات التجميلية، فإن هذه in vitro والأساليب هي الخيار الإلزامي الوحيد.

In cases where in vivo الاختبار لا يمكن تجنبه، ونحن نعمل في امتثال كامل لمبادئ 3R. ونبدأ الاختبار بموضوع واحد ولن ندرج مواضيع إضافية إلا عند الضرورة، استنادا إلى النتائج. ويرصد الأطباء البيطريون المخبرون الموضوعات باستمرار طوال فترة الاختبار؛ وفي حالة حدوث رد فعل شديد، يتم إنهاء الاختبار على الفور، وتُدار المعالجة المسبقة الملائمة. وتُسجل جميع الملاحظات وفقاً لإجراءات التشغيل الموحدة المتوافقة مع النظام.

ومن المزايا الرئيسية التي يتمتع بها مختبرنا أن نتائج الاختبار يمكن أن تدمج مباشرة في بياناتكم التنظيمية. وتفي تقارير الدراسة الشاملة المتوافقة مع نموذج منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي بمتطلبات نظامي الاتحاد الأوروبي المتعلقين بالبحوث الاقتصادية والاجتماعية واتفاقية حقوق الأشخاص ذوي الإعاقة، و FIFRA و TSCA، وKKDIK. وبالإضافة إلى ذلك، نقدم جميع البيانات اللازمة كاملة لإعداد صحيفة بيانات السلامة الخاصة بمنتجكم.

الأسئلة الشائعة

ومن بين أكثر الأسئلة شيوعاً التي نتلقىها فيما يتعلق باختبار تهيج العينين، وهو المبدأ التوجيهي لمنظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي الذي يلائم أي منتج. ويتوقف الاختيار على الشكل المادي للمنتج، وعلى المرونة، وعلى هدفك التنظيمي. وقد يكون من المناسب بالنسبة لمواد حل الماء أن تكون مادة TG 491 (STE) مناسبة؛ وبالنسبة لمواد حل المياه، أو TG 437 (BCOP) أو TG 492 (RhCE)؛ وبالنسبة للمنتجات الأمواج، أو TG 438 (ICE). عندما in vivo والاختبار مطلوب للتصنيف النهائي، ويُستخدم المعيار TG 405. ويقي ِّم مختبرنا خصائص منتجك لكي يوصي بأنسب طريقة.

وثمة سؤال مشترك آخر هو ما إذا كان من المطلوب إجراء اختبار لـ 405 مادة ذات قيمة عالية جداً.
لا وتصنف المواد التي تحتوي على رشاشات رشاشة من طراز PH ' 2 ' أو ' 11.5 ' بشكل مباشر على أنها ' ضرر / خام / راسلي " (الفئة 1) دون تطبيق " TG 405 " لمنظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي. وقد كلفت منظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي بهذا النهج لمنع الاستخدام غير الضروري للحيوانات.

ويُسأل أيضاً في كثير من الأحيان عما إذا كان في المترو ويمكن أن تكون نتائج الاختبار بديلاً لنموذج TG 405 التابع لمنظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي. نعم، في العديد من الحالات يمكنهم In particular, validated in vitro اختبارات مثل BCOP و RhCE قد تكون كافية لتصنيف المادة على أنها "Category 1" غير أنه بالنسبة للتمييز في الفئة 2 ألف/2 باء، يعتبر in vivo وقد يلزم إجراء اختبار في بعض الحالات. فيما يتعلق بمدة الاختبار، in vivo TG 405 test takes approximately 3-4 weeks, including an observation period that can last up to 21 days; in vitro ومن ناحية أخرى، تؤدي الاختبارات البديلة عادة إلى نتائج في غضون أسبوع واحد إلى أسبوعين. ويشمل ذلك استعراضات الإبلاغ وضمان الجودة، يبلغ مجموع المدة 4-6 أسابيع.

والعيون هي أضعف أجهزةنا من المخاطر الكيميائية، وينبغي أن يكون إظهار هذه الحساسية علميا أولوية لكل مصنع مسؤول. وباستخدام TG 405 لمنظمة التعاون والتنمية في الميدان الاقتصادي والتكميل في الاختبارات البديلة للفيترو، يُنشئ مختبرنا موجز أمان الأوعية لمنتجاتك وفقاً لأعلى المعايير العلمية وبالامتثال التام لمبادئ 3R. وللاطلاع على احتياجاتك في مجال تهيج العينين وتقييم التآكل، يرجى الاتصال بمختبرنا المصدق على مشروع GLP، ودعينا نخطط لاستراتيجيتكم للاختبارات المصممة خصيصا.